Спектрофотометрическое определение аминокислот в водных растворах. Котова Д.Л - 8 стр.

                                        8
       од и наковы ми , и змерени я след у ет провод и ть в области мало
       концентри рованны х растворов);
    4) Закон вы полняется д ля части ц од ной при род ы (и змерени е след у ет
       вести в таком и нтервалеконцентраци й , гд езавед омо не может бы ть
       реакци й д и ссоци аци и , ассоци аци и , ф лу оресценци и и хи ми чески х
       реакци й сраствори телем);
    5) П у чок света д олжен бы тьпараллельны м.

       Е сли и сслед овани я провод ят с гомогенной и зотропной сред ой
(толщ и на светопоглощ аю щ его слоя (l) = const), то зави си мость
абсорбци онности от концентраци и отображаетсяпрямой ли ни ей . Значени е
тангенса у гла наклона э той прямой равно коэ ф ф и ци енту поглощ ени я
света.
       О тклонени я от прямой возможны и з-за хи ми чески х реакци й,
при вод ящ и х к сд ви гу хи ми ческого равновеси я, которы й, в свою очеред ь,
вы з ы вает и з менени е концентраци и поглощ аю щ ей ф ормы вещ ества. К
при чи нам отклонени я прямой от ли ней ности относи тся рассеяни е
поглощ аю щ его вещ ества в объеме объекта, которое наблю д ается при
спектроф отометри и         би ологи чески х     объектов      со     сложной
пространственной стру кту рой. Т ак же отклонени я могу т появляться и з-за
при борной ош и бки , вы зы ваемой нели ней ностью з ави си мости тока
ф отоэ лементов от и нтенси вности потока света при малы х (менее 0,1) и
больш и х (1,5) з начени ях абсорбци онности раствора (э та опасностьреальна
в д альней у льтраф и олетовой области 190 - 220 нм, гд е рассеянны й свет
вы з ы вает сд ви гмакси му мов поглощ ени я) [3].
       У вели чени е ш и ри ны щ ели спектрального при бора при вод и т к
пад ени ю опти ческой плотности и показателя светопоглощ ени я в
макси му мах спектральны х ли ни й и и х у вели чени ю в ми ни му мах. Э ти
и зменени я мало заметны д ля вещ еств с ш и роки ми спектральны ми
полосами . Н еобход и мо, чтобы ш и ри на щ ели бы ла меньш е полу ш и ри ны
спектральной полосы .
       Е сли нельзя и з бежать отклонени й от закона Бу гера-Л амберта-Бера,
и зменяя у слови я анали за (анали ти ческу ю д ли ну волны , раствори тель,
и нтервал концентраци й), то вы би раю т область, гд е зави си мость
абсорбци онности от концентраци и ли ней на при бли женно.

      Н а прак тик е следует помн ить об оптимальн ы х условиях
спек трофотометрическ ого определен ия:

1)     при опред елени и в растворе од ного светопоглощ аю щ его вещ ества
вы би раю т анали ти ческу ю д ли ну волны на макси му меполосы поглощ ени я.
Е сли в спектре несколько полос, вы бор останавли ваю т на более
и нтенси вной полосе, что обу славли вает вы соку ю чу встви тельность
опред елени я. Более пред почти тельны плоски е макси му мы , так как
погреш ностьв у становлени и д ли ны волны зд есьми ни мальна. Н еобход и мо