Ку-лихорадка: Этиология, эпидемиология, клиника, лабораторная диагностика, лечение. Пашанина Т.П - 19 стр.

UptoLike

19
êðàñíîãî ðàñòâîðà, ñîäåðæàùåãî ÀÃ êîêñèåëë Áåðíåòà («+» êîí-
òðîëü), â äâå äðóãèå ëóíêè — ïî 100 ìêë çåëåíîãî ðàñòâîðà,
ñîäåðæàùåãî ãåòåðîëîãè÷íûé Àà («-» êîíòðîëü), à â îñòàëüíûå
ëóíêè âíîñÿò ïî 100 ìêë èññëåäóåìûõ îáðàçöîâ. Ïëàíøåòû çàê-
ðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò 1 ÷ ïðè 37
°Ñ. Çàòåì ëóíêè ïðî-
ìûâàþò 3 ðàçà ÔÑÁ ñ òâèí-80.
3. Ñâÿçûâàíèå êîíúþãàòà. Âî âñå ëóíêè, êðîìå À1, âíîñÿò
ïî 100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà — ïîëèêëîíàëüíûå ÀÒ
ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà, ìå÷åííûå ïåðîêñèäàçîé õðåíà. Ïëàíøåò
íàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò âî âëàæíîé êàìåðå ïðè 37
°Ñ
1 ÷, çàòåì îòìûâàþò 5 ðàç ÔÑÁ ñ òâèí-80.
4. Ïðîâåäåíèå ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Âî âñå ëóíêè âíîñÿò
ïî 100 ìêë ñóáñòðàòíîãî ðàñòâîðà (ñìåñü ÎÔÄ è ïåðåêèñè âîäî-
ðîäà íà öèòðàòíîì áóôåðå), ïëàíøåò çàêðûâàþò êðûøêîé è âû-
äåðæèâàþò 20 ìèí â òåìíîòå ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå.
5. Îñòàíîâêà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Ðåàêöèþ îñòàíàâëè-
âàþò âíåñåíèåì â êàæäóþ ëóíêó ïî 50 ìêë ðàñòâîðà ñåðíîé
êèñëîòû.
Ïî îêîí÷àíèè ðåàêöèè îñóùåñòâëÿþò åå âèçóàëüíûé èëè
èíñòðóìåíòàëüíûé ó÷åò. Ïðè ïðàâèëüíîì ïðîâåäåíèè âñåõ ñòà-
äèé àíàëèçà ñîäåðæèìîå ëóíîê ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è «-» êîí-
òðîëåì îñòàåòñÿ áåñöâåòíûì èëè áëåäíî-æåëòûì, à ñ «+» êîíò-
ðîëåì ïðèîáðåòàåò æåëòî-êîðè÷íåâóþ îêðàñêó.
Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå èññëåäóåìûé îáðàçåö ñ÷èòàåòñÿ ïî-
ëîæèòåëüíûì, åñëè èìåþòñÿ îò÷åòëèâûå ðàçëè÷èÿ â èíòåíñèâ-
íîñòè åãî îêðàøèâàíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ ðàñòâîðàìè â ëóíêàõ ñ
êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è «-» êîíòðîëåì. Ïðè èíñòðóìåíòàëüíîì ó÷åòå
èçìåðÿþò ÎÏ ïðè äëèíå âîëíû 490 ìì íåïîñðåäñòâåííî â ëóí-
êàõ ïëàíøåòà ñ ïîìîùüþ âåðòèêàëüíîãî ôîòîìåòðà.  êà÷åñòâå
êþâåòû ñðàâíåíèÿ ñëóæèò ëóíêà À1 ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà. Åñëè
àíàëèç ïðîâåäåí ïðàâèëüíî, òî ñðåäíåå çíà÷åíèå ÎÏ â ëóíêàõ ñ
«+» êîíòðîëåì äîëæíî áûòü íå ìåíåå 0,4 åäèíèö ÎÏ, à â ëóíêàõ
ñ «-» êîíòðîëåì — íå ïðåâûøàòü 0,2. Êîëè÷åñòâåííóþ îöåíêó
ÒÈÔÀ ïðîâîäÿò ïî ôîðìóëå: Ê = 0,1 + ÎÏñð — äëÿ «-» êîíòðî-
ëÿ. Åñëè ÎÏ èññëåäóåìîé ïðîáû > Ê, òî åå èññëåäóþò ïîâòîðíî
â äóáëèêàòå è ïðè ïîëó÷åíèè àíàëîãè÷íîãî ðåçóëüòàòà ñ÷èòàþò
ñîäåðæàùåé Êó-àíòèãåí. Åñëè ÎÏ èññëåäóåìîé ïðîáû Ê, òî
ñ÷èòàþò, ÷òî îíà íå ñîäåðæèò Êó-àíòèãåí.
êðàñíîãî ðàñòâîðà, ñîäåðæàùåãî ÀÃ êîêñèåëë Áåðíåòà («+» êîí-
òðîëü), â äâå äðóãèå ëóíêè — ïî 100 ìêë çåëåíîãî ðàñòâîðà,
ñîäåðæàùåãî ãåòåðîëîãè÷íûé Àà («-» êîíòðîëü), à â îñòàëüíûå
ëóíêè âíîñÿò ïî 100 ìêë èññëåäóåìûõ îáðàçöîâ. Ïëàíøåòû çàê-
ðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò 1 ÷ ïðè 37 °Ñ. Çàòåì ëóíêè ïðî-
ìûâàþò 3 ðàçà ÔÑÁ ñ òâèí-80.
      3. Ñâÿçûâàíèå êîíúþãàòà. Âî âñå ëóíêè, êðîìå À1, âíîñÿò
ïî 100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà — ïîëèêëîíàëüíûå ÀÒ
ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà, ìå÷åííûå ïåðîêñèäàçîé õðåíà. Ïëàíøåò
íàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò âî âëàæíîé êàìåðå ïðè 37 °Ñ
1 ÷, çàòåì îòìûâàþò 5 ðàç ÔÑÁ ñ òâèí-80.
      4. Ïðîâåäåíèå ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Âî âñå ëóíêè âíîñÿò
ïî 100 ìêë ñóáñòðàòíîãî ðàñòâîðà (ñìåñü ÎÔÄ è ïåðåêèñè âîäî-
ðîäà íà öèòðàòíîì áóôåðå), ïëàíøåò çàêðûâàþò êðûøêîé è âû-
äåðæèâàþò 20 ìèí â òåìíîòå ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå.
      5. Îñòàíîâêà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Ðåàêöèþ îñòàíàâëè-
âàþò âíåñåíèåì â êàæäóþ ëóíêó ïî 50 ìêë ðàñòâîðà ñåðíîé
êèñëîòû.
      Ïî îêîí÷àíèè ðåàêöèè îñóùåñòâëÿþò åå âèçóàëüíûé èëè
èíñòðóìåíòàëüíûé ó÷åò. Ïðè ïðàâèëüíîì ïðîâåäåíèè âñåõ ñòà-
äèé àíàëèçà ñîäåðæèìîå ëóíîê ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è «-» êîí-
òðîëåì îñòàåòñÿ áåñöâåòíûì èëè áëåäíî-æåëòûì, à ñ «+» êîíò-
ðîëåì ïðèîáðåòàåò æåëòî-êîðè÷íåâóþ îêðàñêó.
      Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå èññëåäóåìûé îáðàçåö ñ÷èòàåòñÿ ïî-
ëîæèòåëüíûì, åñëè èìåþòñÿ îò÷åòëèâûå ðàçëè÷èÿ â èíòåíñèâ-
íîñòè åãî îêðàøèâàíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ ðàñòâîðàìè â ëóíêàõ ñ
êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è «-» êîíòðîëåì. Ïðè èíñòðóìåíòàëüíîì ó÷åòå
èçìåðÿþò ÎÏ ïðè äëèíå âîëíû 490 ìì íåïîñðåäñòâåííî â ëóí-
êàõ ïëàíøåòà ñ ïîìîùüþ âåðòèêàëüíîãî ôîòîìåòðà.  êà÷åñòâå
êþâåòû ñðàâíåíèÿ ñëóæèò ëóíêà À1 ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà. Åñëè
àíàëèç ïðîâåäåí ïðàâèëüíî, òî ñðåäíåå çíà÷åíèå ÎÏ â ëóíêàõ ñ
«+» êîíòðîëåì äîëæíî áûòü íå ìåíåå 0,4 åäèíèö ÎÏ, à â ëóíêàõ
ñ «-» êîíòðîëåì — íå ïðåâûøàòü 0,2. Êîëè÷åñòâåííóþ îöåíêó
ÒÈÔÀ ïðîâîäÿò ïî ôîðìóëå: Ê = 0,1 + ÎÏñð — äëÿ «-» êîíòðî-
ëÿ. Åñëè ÎÏ èññëåäóåìîé ïðîáû > Ê, òî åå èññëåäóþò ïîâòîðíî
â äóáëèêàòå è ïðè ïîëó÷åíèè àíàëîãè÷íîãî ðåçóëüòàòà ñ÷èòàþò
ñîäåðæàùåé Êó-àíòèãåí. Åñëè ÎÏ èññëåäóåìîé ïðîáû ≤ Ê, òî
ñ÷èòàþò, ÷òî îíà íå ñîäåðæèò Êó-àíòèãåí.


                             – 19 –