Ку-лихорадка: Этиология, эпидемиология, клиника, лабораторная диагностика, лечение. Пашанина Т.П - 17 стр.

UptoLike

17
2. Ñâÿçûâàíèå Êó-àíòèòåë. Îäíó èç ëóíîê (À1) îñòàâëÿþò íåçà-
ïîëíåííîé (êîíòðîëü ñóáñòðàòà), äðóãóþ (Â2) — òàêæå îñòàâëÿþò
íåçàïîëíåííîé (êîíòðîëü êîíúþãàòà). Â äâå ëóíêè âíîñÿò ïî 100 ìêë
êðàñíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåð-
íåòà, â äâå äðóãèõ æå — ïî 100 ìêë çåëåíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, íå
ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà (ñîîòâåòñòâåííî ïîëîæè-
òåëüíûé è îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëè). Âî âñå îñòàëüíûå ëóíêè âíîñÿò
ïî 90 ìêë îðàíæåâîãî ðàñòâîðà ÔÁÐ ñ òâèíîì-80 è 10 ìêë èññëåäó-
åìûõ ñûâîðîòîê, ïðåäâàðèòåëüíî ðàçâåäåííûõ òåì æå ðàñòâîðîì â
40 ðàç.  êîíå÷íîì ñ÷åòå èññëåäóåìàÿ ñûâîðîòêà ðàçâîäèòñÿ â ëóíêå â
400 ðàç. Ïëàíøåò çàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò â òå÷åíèå 1 ÷
ïðè 37
°Ñ. Ïîñëå ýòîãî ëóíêè 3 ðàçà ïðîìûâàþò îðàíæåâûì ðàñòâî-
ðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80.
3. Ñâÿçûâàíèå êîíúþãàòà. Âî âñå ëóíêè, êðîìå À1, âíîñÿò ïî
100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà îðàíæåâîãî öâåòà, ïëàí-
øåò íàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò ïðè 37
°Ñ â òå÷åíèå 1 ÷
âî âëàæíîé êàìåðå. Çàòåì ëóíêè ïÿòèêðàòíî ïðîìûâàþò îðàíæå-
âûì ðàñòâîðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80.
4. Ïðîâåäåíèå ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Âî âñå ëóíêè äîáàâ-
ëÿþò ïî 100 ìêë ñóáñòðàòíîãî ðàñòâîðà (ñìåñü ÎÔÄ ñ ðàñòâîðîì
ïåðîêñèäàçû õðåíà), ïëàíøåò íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæè-
âàþò â òåìíîòå 20 ìèí ïðè 15—25
°Ñ.
5. Îñòàíîâêà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Ðåàêöèþ îñòàíàâëè-
âàþò âíåñåíèåì â êàæäóþ ëóíêó ïî 50 ìêë ðàñòâîðà ñåðíîé
êèñëîòû.
Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò âèçóàëüíî èëè èíñòðóìåíòàëüíî.
Åñëè ðåàêöèÿ âûïîëíåíà ïðàâèëüíî, òî ñîäåðæèìîå ëóíîê ñ
êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì äîëæíî áûòü
áåñöâåòíûì èëè áëåäíî-æåëòûì, à ñ ïîëîæèòåëüíûì êîíòðî-
ëåì — ïðèîáðåñòè æåëòî-êîðè÷íåâóþ îêðàñêó.
Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå èññëåäóåìûé îáðàçåö îöåíèâàåòñÿ êàê
ïîëîæèòåëüíûé, åñëè èìåþòñÿ îò÷åòëèâûå ðàçëè÷èÿ â èíòåí-
ñèâíîñòè åãî îêðàøèâàíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ ðàñòâîðàìè â ëóíêàõ
ñ êîíòðîëÿìè ñóáñòðàòà, êîíúþãàòà, è îòðèöàòåëüíûé.
Èíñòðóìåíòàëüíûé ó÷åò ïðåäïîëàãàåò èçìåðåíèå ÎÏ ïðè äëèíå
âîëíû 490 íì íåïîñðåäñòâåííî â ëóíêàõ ïëàíøåòà ñ ïîìîùüþ âåð-
òèêàëüíîãî ôîòîìåòðà.  êà÷åñòâå êþâåòû ñðàâíåíèÿ ñëóæèò ëóíêà
À1 ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà. Ïðè ïðàâèëüíîì ïðîâåäåíèè àíàëèçà
ñðåäíåå çíà÷åíèå â ëóíêàõ ñ «+» êîíòðîëåì äîëæíî áûòü íå ìåíåå
      2. Ñâÿçûâàíèå Êó-àíòèòåë. Îäíó èç ëóíîê (À1) îñòàâëÿþò íåçà-
ïîëíåííîé (êîíòðîëü ñóáñòðàòà), äðóãóþ (Â2) — òàêæå îñòàâëÿþò
íåçàïîëíåííîé (êîíòðîëü êîíúþãàòà). Â äâå ëóíêè âíîñÿò ïî 100 ìêë
êðàñíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåð-
íåòà, â äâå äðóãèõ æå — ïî 100 ìêë çåëåíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, íå
ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà (ñîîòâåòñòâåííî ïîëîæè-
òåëüíûé è îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëè). Âî âñå îñòàëüíûå ëóíêè âíîñÿò
ïî 90 ìêë îðàíæåâîãî ðàñòâîðà ÔÁÐ ñ òâèíîì-80 è 10 ìêë èññëåäó-
åìûõ ñûâîðîòîê, ïðåäâàðèòåëüíî ðàçâåäåííûõ òåì æå ðàñòâîðîì â
40 ðàç.  êîíå÷íîì ñ÷åòå èññëåäóåìàÿ ñûâîðîòêà ðàçâîäèòñÿ â ëóíêå â
400 ðàç. Ïëàíøåò çàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò â òå÷åíèå 1 ÷
ïðè 37 °Ñ. Ïîñëå ýòîãî ëóíêè 3 ðàçà ïðîìûâàþò îðàíæåâûì ðàñòâî-
ðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80.
      3. Ñâÿçûâàíèå êîíúþãàòà. Âî âñå ëóíêè, êðîìå À1, âíîñÿò ïî
100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà îðàíæåâîãî öâåòà, ïëàí-
øåò íàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò ïðè 37 °Ñ â òå÷åíèå 1 ÷
âî âëàæíîé êàìåðå. Çàòåì ëóíêè ïÿòèêðàòíî ïðîìûâàþò îðàíæå-
âûì ðàñòâîðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80.
      4. Ïðîâåäåíèå ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Âî âñå ëóíêè äîáàâ-
ëÿþò ïî 100 ìêë ñóáñòðàòíîãî ðàñòâîðà (ñìåñü ÎÔÄ ñ ðàñòâîðîì
ïåðîêñèäàçû õðåíà), ïëàíøåò íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæè-
âàþò â òåìíîòå 20 ìèí ïðè 15—25 °Ñ.
      5. Îñòàíîâêà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Ðåàêöèþ îñòàíàâëè-
âàþò âíåñåíèåì â êàæäóþ ëóíêó ïî 50 ìêë ðàñòâîðà ñåðíîé
êèñëîòû.
      Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò âèçóàëüíî èëè èíñòðóìåíòàëüíî.
Åñëè ðåàêöèÿ âûïîëíåíà ïðàâèëüíî, òî ñîäåðæèìîå ëóíîê ñ
êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì äîëæíî áûòü
áåñöâåòíûì èëè áëåäíî-æåëòûì, à ñ ïîëîæèòåëüíûì êîíòðî-
ëåì — ïðèîáðåñòè æåëòî-êîðè÷íåâóþ îêðàñêó.
      Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå èññëåäóåìûé îáðàçåö îöåíèâàåòñÿ êàê
ïîëîæèòåëüíûé, åñëè èìåþòñÿ îò÷åòëèâûå ðàçëè÷èÿ â èíòåí-
ñèâíîñòè åãî îêðàøèâàíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ ðàñòâîðàìè â ëóíêàõ
ñ êîíòðîëÿìè ñóáñòðàòà, êîíúþãàòà, è îòðèöàòåëüíûé.
      Èíñòðóìåíòàëüíûé ó÷åò ïðåäïîëàãàåò èçìåðåíèå ÎÏ ïðè äëèíå
âîëíû 490 íì íåïîñðåäñòâåííî â ëóíêàõ ïëàíøåòà ñ ïîìîùüþ âåð-
òèêàëüíîãî ôîòîìåòðà.  êà÷åñòâå êþâåòû ñðàâíåíèÿ ñëóæèò ëóíêà
À1 ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà. Ïðè ïðàâèëüíîì ïðîâåäåíèè àíàëèçà
ñðåäíåå çíà÷åíèå â ëóíêàõ ñ «+» êîíòðîëåì äîëæíî áûòü íå ìåíåå

                               – 17 –