ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
– 17 –
2. Ñâÿçûâàíèå Êó-àíòèòåë. Îäíó èç ëóíîê (À1) îñòàâëÿþò íåçà-
ïîëíåííîé (êîíòðîëü ñóáñòðàòà), äðóãóþ (Â2) — òàêæå îñòàâëÿþò
íåçàïîëíåííîé (êîíòðîëü êîíúþãàòà). Â äâå ëóíêè âíîñÿò ïî 100 ìêë
êðàñíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåð-
íåòà, â äâå äðóãèõ æå — ïî 100 ìêë çåëåíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, íå
ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà (ñîîòâåòñòâåííî ïîëîæè-
òåëüíûé è îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëè). Âî âñå îñòàëüíûå ëóíêè âíîñÿò
ïî 90 ìêë îðàíæåâîãî ðàñòâîðà ÔÁÐ ñ òâèíîì-80 è 10 ìêë èññëåäó-
åìûõ ñûâîðîòîê, ïðåäâàðèòåëüíî ðàçâåäåííûõ òåì æå ðàñòâîðîì â
40 ðàç.  êîíå÷íîì ñ÷åòå èññëåäóåìàÿ ñûâîðîòêà ðàçâîäèòñÿ â ëóíêå â
400 ðàç. Ïëàíøåò çàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò â òå÷åíèå 1 ÷
ïðè 37
°Ñ. Ïîñëå ýòîãî ëóíêè 3 ðàçà ïðîìûâàþò îðàíæåâûì ðàñòâî-
ðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80.
3. Ñâÿçûâàíèå êîíúþãàòà. Âî âñå ëóíêè, êðîìå À1, âíîñÿò ïî
100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà îðàíæåâîãî öâåòà, ïëàí-
øåò íàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò ïðè 37
°Ñ â òå÷åíèå 1 ÷
âî âëàæíîé êàìåðå. Çàòåì ëóíêè ïÿòèêðàòíî ïðîìûâàþò îðàíæå-
âûì ðàñòâîðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80.
4. Ïðîâåäåíèå ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Âî âñå ëóíêè äîáàâ-
ëÿþò ïî 100 ìêë ñóáñòðàòíîãî ðàñòâîðà (ñìåñü ÎÔÄ ñ ðàñòâîðîì
ïåðîêñèäàçû õðåíà), ïëàíøåò íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæè-
âàþò â òåìíîòå 20 ìèí ïðè 15—25
°Ñ.
5. Îñòàíîâêà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Ðåàêöèþ îñòàíàâëè-
âàþò âíåñåíèåì â êàæäóþ ëóíêó ïî 50 ìêë ðàñòâîðà ñåðíîé
êèñëîòû.
Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò âèçóàëüíî èëè èíñòðóìåíòàëüíî.
Åñëè ðåàêöèÿ âûïîëíåíà ïðàâèëüíî, òî ñîäåðæèìîå ëóíîê ñ
êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì äîëæíî áûòü
áåñöâåòíûì èëè áëåäíî-æåëòûì, à ñ ïîëîæèòåëüíûì êîíòðî-
ëåì — ïðèîáðåñòè æåëòî-êîðè÷íåâóþ îêðàñêó.
Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå èññëåäóåìûé îáðàçåö îöåíèâàåòñÿ êàê
ïîëîæèòåëüíûé, åñëè èìåþòñÿ îò÷åòëèâûå ðàçëè÷èÿ â èíòåí-
ñèâíîñòè åãî îêðàøèâàíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ ðàñòâîðàìè â ëóíêàõ
ñ êîíòðîëÿìè ñóáñòðàòà, êîíúþãàòà, è îòðèöàòåëüíûé.
Èíñòðóìåíòàëüíûé ó÷åò ïðåäïîëàãàåò èçìåðåíèå ÎÏ ïðè äëèíå
âîëíû 490 íì íåïîñðåäñòâåííî â ëóíêàõ ïëàíøåòà ñ ïîìîùüþ âåð-
òèêàëüíîãî ôîòîìåòðà.  êà÷åñòâå êþâåòû ñðàâíåíèÿ ñëóæèò ëóíêà
À1 ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà. Ïðè ïðàâèëüíîì ïðîâåäåíèè àíàëèçà
ñðåäíåå çíà÷åíèå â ëóíêàõ ñ «+» êîíòðîëåì äîëæíî áûòü íå ìåíåå
2. Ñâÿçûâàíèå Êó-àíòèòåë. Îäíó èç ëóíîê (À1) îñòàâëÿþò íåçà- ïîëíåííîé (êîíòðîëü ñóáñòðàòà), äðóãóþ (Â2) — òàêæå îñòàâëÿþò íåçàïîëíåííîé (êîíòðîëü êîíúþãàòà).  äâå ëóíêè âíîñÿò ïî 100 ìêë êðàñíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåð- íåòà, â äâå äðóãèõ æå — ïî 100 ìêë çåëåíîãî ðàñòâîðà ñûâîðîòêè, íå ñîäåðæàùåé JgG ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà (ñîîòâåòñòâåííî ïîëîæè- òåëüíûé è îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëè). Âî âñå îñòàëüíûå ëóíêè âíîñÿò ïî 90 ìêë îðàíæåâîãî ðàñòâîðà ÔÁÐ ñ òâèíîì-80 è 10 ìêë èññëåäó- åìûõ ñûâîðîòîê, ïðåäâàðèòåëüíî ðàçâåäåííûõ òåì æå ðàñòâîðîì â 40 ðàç.  êîíå÷íîì ñ÷åòå èññëåäóåìàÿ ñûâîðîòêà ðàçâîäèòñÿ â ëóíêå â 400 ðàç. Ïëàíøåò çàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò â òå÷åíèå 1 ÷ ïðè 37 °Ñ. Ïîñëå ýòîãî ëóíêè 3 ðàçà ïðîìûâàþò îðàíæåâûì ðàñòâî- ðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80. 3. Ñâÿçûâàíèå êîíúþãàòà. Âî âñå ëóíêè, êðîìå À1, âíîñÿò ïî 100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà îðàíæåâîãî öâåòà, ïëàí- øåò íàêðûâàþò êðûøêîé è èíêóáèðóþò ïðè 37 °Ñ â òå÷åíèå 1 ÷ âî âëàæíîé êàìåðå. Çàòåì ëóíêè ïÿòèêðàòíî ïðîìûâàþò îðàíæå- âûì ðàñòâîðîì ÔÁÐ ñ òâèí-80. 4. Ïðîâåäåíèå ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Âî âñå ëóíêè äîáàâ- ëÿþò ïî 100 ìêë ñóáñòðàòíîãî ðàñòâîðà (ñìåñü ÎÔÄ ñ ðàñòâîðîì ïåðîêñèäàçû õðåíà), ïëàíøåò íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæè- âàþò â òåìíîòå 20 ìèí ïðè 15—25 °Ñ. 5. Îñòàíîâêà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè. Ðåàêöèþ îñòàíàâëè- âàþò âíåñåíèåì â êàæäóþ ëóíêó ïî 50 ìêë ðàñòâîðà ñåðíîé êèñëîòû. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò âèçóàëüíî èëè èíñòðóìåíòàëüíî. Åñëè ðåàêöèÿ âûïîëíåíà ïðàâèëüíî, òî ñîäåðæèìîå ëóíîê ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà è îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì äîëæíî áûòü áåñöâåòíûì èëè áëåäíî-æåëòûì, à ñ ïîëîæèòåëüíûì êîíòðî- ëåì — ïðèîáðåñòè æåëòî-êîðè÷íåâóþ îêðàñêó. Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå èññëåäóåìûé îáðàçåö îöåíèâàåòñÿ êàê ïîëîæèòåëüíûé, åñëè èìåþòñÿ îò÷åòëèâûå ðàçëè÷èÿ â èíòåí- ñèâíîñòè åãî îêðàøèâàíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ ðàñòâîðàìè â ëóíêàõ ñ êîíòðîëÿìè ñóáñòðàòà, êîíúþãàòà, è îòðèöàòåëüíûé. Èíñòðóìåíòàëüíûé ó÷åò ïðåäïîëàãàåò èçìåðåíèå ÎÏ ïðè äëèíå âîëíû 490 íì íåïîñðåäñòâåííî â ëóíêàõ ïëàíøåòà ñ ïîìîùüþ âåð- òèêàëüíîãî ôîòîìåòðà.  êà÷åñòâå êþâåòû ñðàâíåíèÿ ñëóæèò ëóíêà À1 ñ êîíòðîëåì ñóáñòðàòà. Ïðè ïðàâèëüíîì ïðîâåäåíèè àíàëèçà ñðåäíåå çíà÷åíèå â ëóíêàõ ñ «+» êîíòðîëåì äîëæíî áûòü íå ìåíåå – 17 –
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 15
- 16
- 17
- 18
- 19
- …
- следующая ›
- последняя »