Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 14 стр.

       Хроматографию на пластинках проводят в закрытых               целлюлозой.     Такие           пластинки      выпускаются         про-
стеклянных камерах, предварительно насыщенных парами                 мышленностью, например «Фиксион 50х8» (Венгрия), или
растворителя,      восходящим      способом      при    комнатной    могут быть приготовлены в лаборатории.
темпераруре или при нагревании одномерно или двумерно.                     Сочетание на пластинках «Фиксион» процессов
При одномерной хроматографии пробы на пластинку                      ионообменной         и       тонкослойной     хроматографии        при
наносят     в    виде   полос.   Двумерный       способ    (второй   разделении      обусловливает             высокую    разрешающую
растворитель движется по пластинке в направлении, пер-               способность этого метода.
пендикулярном       первому)     используют      для   повышения           Пластинки могут быть использованы для разделения
эффективности метода.                                                аминокислот, олигопептидов, аминов и др.
       Часто тонкослойную хроматографию сочетают с                         Противоточная              хроматография.          Этот     метод
электрофорезом (метод пептидных карт). В этом случае                 разделения основан на распределении соединений между
пробу на пластинку наносят в виде небольшого пятнышка (d             двумя несмешивающимися жидкими фазами. Он отличается
~ 2—3 мм) в одном из углов пластинки на расстоянии 20 мм             от обычной распределительной хроматографии тем, что ни
от ее краев.                                                         одна из фаз не фиксируется на сорбенте или бумаге, однако в
       Многие коммерческие сорбенты для тонкослойной                 основе его лежит тот же принцип, что и в традиционной
хроматографии содержат флуоресцентные красители, что                 распределительной хроматографии, а именно различие в
позволяет       идентифицировать      разделяемые      соединения,   коэффициентах распределения соединений между двумя
поглощаемые в ультрафиолетовой области спектра.                      несмешивающимися              фазами.     В   качестве      фаз     для
       Разделение       аминокислот        (гидролизатов   белков)   противоточного разделения применяют смеси растворителей,
методом тонкослойной хроматографии осуществляют на                   буферов,     солей       и     различные      комплексообразующие
пластинках, покрытых тонким слоем ионообменной смолы                 реагенты.
полистирольной          природы        с       сульфокислотными            Для     проведения         такого     разделения     пользуются
группировками (типа Дауэкс 50х8) или ионообменной                    специальным прибором для противоточного распределения