Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 16 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

Рис. 3. Схема прибора для газожидкостной хроматографии:
1 — детектор; 2 — усилитель; 3 — самописец; 4 — интегра-
тор; 5 — хроматографическая колонка; 6— термостат; 7—
устройство, регулирующее температуру термостата.
Ионообменная хроматография. Данный вид
хроматографии основан на притяжении противоположно
заряженных частиц, имеющих способные к ионизации
группы, которые обусловливают суммарный
положительный или отрицательный заряд соединения.
Величина заряда зависит от рН и изоионной точки (pJ).
Величина pJ различна в зависимости от характера
данного белка. Для определения pJ белков часто используют
химический метод: предварительно готовят растворы белка,
кислоты и щелочи. Раствор белка разливают в несколько
пробирок и вносят растворы щелочи и кислоты. Там, где
помутнение среды максимальное, рН раствора будет
соответствовать изоионной точке. Степень взаимодействия
амфотерной молекулы белка с матрицей ионного обмена
зависит:
от рН рабочей среды, который предопределяет
число заряженных групп твердой фазы, способных
реагировать, и суммарного электрического заряда
молекулы, содержащей ионы противоположного
заряда;
от концентрации других ионов того же заряда, что
и подлежащая выделению молекула, которые
вступают с ней в конкуренцию за связывание.
Чтобы адсорбировать и избирательно элюировать
подлежащие выделению молекулы, пользуются изменениями
взаимодействий в зависимости от рН и концентрации
молекулярных ионов в растворе.
При возрастании ионной силы повышается
концентрация противоионов, которая усиливает
конкуренцию между разделяемыми частицами и солями по
отношению к заряженным группам носителя. Молекулы с
самым слабым суммарным зарядом замещаются
противоионами и отделяются от носителя (см. рис. ниже). 
                                                              пробирок и вносят растворы щелочи и кислоты. Там, где
                                                              помутнение     среды    максимальное,    рН   раствора   будет
                                                              соответствовать изоионной точке. Степень взаимодействия
                                                              амфотерной молекулы белка с матрицей ионного обмена
                                                              зависит:
                                                                    от рН рабочей среды, который предопределяет
                                                                         число заряженных групп твердой фазы, способных
                                                                         реагировать, и суммарного электрического заряда
                                                                         молекулы, содержащей ионы противоположного
 Рис. 3. Схема прибора для газожидкостной хроматографии:
                                                                         заряда;
1 — детектор; 2 — усилитель; 3 — самописец; 4 — интегра-
                                                                    от концентрации других ионов того же заряда, что
тор; 5 — хроматографическая колонка; 6— термостат; 7—
                                                                         и подлежащая выделению молекула, которые
  устройство, регулирующее температуру термостата.
                                                                         вступают с ней в конкуренцию за связывание.
      Ионообменная       хроматография.     Данный      вид
                                                                   Чтобы адсорбировать и избирательно элюировать
хроматографии основан на притяжении противоположно
                                                              подлежащие выделению молекулы, пользуются изменениями
заряженных частиц, имеющих способные к ионизации
                                                              взаимодействий в зависимости от рН и концентрации
группы,      которые       обусловливают        суммарный
                                                              молекулярных ионов в растворе.
положительный    или   отрицательный    заряд   соединения.
                                                                   При       возрастании    ионной      силы     повышается
Величина заряда зависит от рН и изоионной точки (pJ).
                                                              концентрация         противоионов,       которая    усиливает
      Величина pJ различна в зависимости от характера         конкуренцию между разделяемыми частицами и солями по
данного белка. Для определения pJ белков часто используют     отношению к заряженным группам носителя. Молекулы с
химический метод: предварительно готовят растворы белка,      самым       слабым     суммарным        зарядом    замещаются
кислоты и щелочи. Раствор белка разливают в несколько         противоионами и отделяются от носителя (см. рис. ниже).

Страницы