Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 18 стр.

UptoLike

Рубрика: 

большим количеством поперечных стенок образуют
матрицу, внутрь которой могут проникать лишь очень
мелкие молекулы, а крупные не достигают ионообменного
участка. Смолы с небольшим числом поперечных связей
имеют «ячейки» большого размера, позволяющие крупным
молекулам проникать внутрь гранул смолы к заряженным
группам на ионообменном участке. Ионный обмен, как
правило, происходит очень быстро, поэтому скорость всего
процесса в целом лимитируется скоростью диффузии ионов
через смолу. Процесс ионного обмена состоит из нескольких
этапов, основными из которых являются: диффузия иона к
поверхности смолы; диффузия иона внутрь границ смолы к
ионообменному участку (лимитирует весь процесс ионного
обмена); обмен ионов на ионообменном участке; диффузия
ионообменника; десорбция элюентом и диффузия об-
менявшегося иона в окружающий раствор.
Смолу оставляют набухать в стакане с
дистиллированной водой, при этом ненабухшие частицы
удаляют. Набухшую смолу помещают в колонку и
подвергают регенерации, пропуская через колонку раствор
НСl концентрацией 1 моль/дм
3
(в случае катионообменника)
или NaOH (в случае анионообменника). Затем колонку
промывают дистиллированной водой до полного удаления
регенерирующего вещества и проводят разделение.
Отработанную смолу можно использовать повторно, для
чего ее предварительно регенерируют, промыв раствором
НС1 или NaOH. Вышеизложенные принципы лежат в основе
выпускаемых промышленностью приборов для
автоматического аминокислотного анализа, работающих по
принципу, предложенному С. Муром и У. X. Стейном (см.
рис. 5).
Рис.5. Схема аминокислотного анализатора:
1 — градиентная камера; 2 — система ввода гидролизата; 3
насос; 4 — колонка; 5 — масляная баня; 6— змеевик; 7,8—
колориметры; 9— самописец
Образец, например белковый гидролизат, поступает в
анализатор через особую систему ввода 2 и с помощью
насоса 3 подается на колонку, заполненную сильнокислым
катионообменником при нужном значении рН. Затем через
большим    количеством     поперечных       стенок     образуют    регенерирующего        вещества   и   проводят    разделение.
матрицу, внутрь которой могут проникать лишь очень                 Отработанную смолу можно использовать повторно, для
мелкие молекулы, а крупные не достигают ионообменного              чего ее предварительно регенерируют, промыв раствором
участка. Смолы с небольшим числом поперечных связей                НС1 или NaOH. Вышеизложенные принципы лежат в основе
имеют «ячейки» большого размера, позволяющие крупным               выпускаемых          промышленностью        приборов     для
молекулам проникать внутрь гранул смолы к заряженным               автоматического аминокислотного анализа, работающих по
группам на ионообменном участке. Ионный обмен, как                 принципу, предложенному С. Муром и У. X. Стейном (см.
правило, происходит очень быстро, поэтому скорость всего           рис. 5).
процесса в целом лимитируется скоростью диффузии ионов
через смолу. Процесс ионного обмена состоит из нескольких
этапов, основными из которых являются: диффузия иона к
поверхности смолы; диффузия иона внутрь границ смолы к
ионообменному участку (лимитирует весь процесс ионного
обмена); обмен ионов на ионообменном участке; диффузия
ионообменника; десорбция элюентом и диффузия об-
менявшегося иона в окружающий раствор.                                        Рис.5. Схема аминокислотного анализатора:
      Смолу    оставляют         набухать    в       стакане   с   1 — градиентная камера; 2 — система ввода гидролизата; 3
дистиллированной водой, при этом ненабухшие частицы                — насос; 4 — колонка; 5 — масляная баня; 6— змеевик; 7,8—
удаляют.   Набухшую      смолу    помещают       в   колонку   и                      колориметры; 9— самописец
подвергают регенерации, пропуская через колонку раствор                       Образец, например белковый гидролизат, поступает в
НСl концентрацией 1 моль/дм3 (в случае катионообменника)           анализатор через особую систему ввода 2 и с помощью
или NaOH (в случае анионообменника). Затем колонку                 насоса 3 подается на колонку, заполненную сильнокислым
промывают дистиллированной водой до полного удаления               катионообменником при нужном значении рН. Затем через