Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 20 стр.

UptoLike

Рубрика: 

Декстриновые гели получают поперечным сшиванием
полисахаридных цепочек декстрина, благодаря чему
растворимый в воде декстрин становится
водонерастворимым, сохраняя при этом гидрофильные
свойства и способность к быстрому набуханию в водной
среде. Варьируя число поперечных сшивок, можно получить
несколько различных типов сефадексов, различающихся
степенью пористости частиц, что позволит применять их для
разделения веществ с различными размерами молекул. Гели
сефадекса нерастворимы и стабильны в воде, солевых
растворах и органических растворителях, а также в
щелочных и слабокислых растворах.
Агарозные гели готовят из агаралинейного
полисахарида, состоящего из чередующихся остатков D-
галактозы и 3,6-ангидро-Z-галактозы. Свойства гелей им
придают водородные меж- и внутримолекулярные связи.
Благодаря своей гидрофильной природе и почти полному
отсутствию заряженных групп агарозные гели подобно
декстриновым лишь в первоначальной степени вызывают
денатурацию и адсорбцию лабильных биохимических
соединений. Агарозные гели отличаются высокой степенью
пористости, хорошо дополняют декстриновые. Они
представляют собой густые суспензии в дистиллированной
воде, содержащей бактериостатическое вещество.
Полиакриламидные гели получают путем
полимеризации акриламида и метилен-бис-акриламида.
Изменяя соотношение между этими двумя полимерами,
удается получить гели с различной степенью пористости. По
своим свойствам они очень близки к декстриновым и
агарозным гелямстабильны в водных буферах в
интервале значений рН от 1 до 10, практически нейтральны и
обладают одинаковой способностью связывать воду.
При гель-фильтрации гель действует подобно
«молекулярному» ситу, разделяя молекулы в зависимости от
молекулярной массы и размера. Матрица представляет собой
множество пористых частиц, между которыми находится
элюент. Если в верхнюю часть колонки (см. рис. 6) внести
анализируемую смесь, то большие молекулы не смогут войти
в поры и будут выходить первыми. Молекулы меньшего
размера, имеющие доступ к порам, задерживаются на
некоторое время в геле и поэтому выходят после больших
молекул в порядке уменьшения молекулярной массы и
размера.
На практике часто возникает необходимость
сконцентрировать водные растворы макромолекул и удалить
      Декстриновые гели получают поперечным сшиванием              представляют собой густые суспензии в дистиллированной
полисахаридных      цепочек     декстрина,    благодаря    чему    воде, содержащей бактериостатическое вещество.
растворимый         в    воде        декстрин         становится         Полиакриламидные         гели       получают      путем
водонерастворимым, сохраняя при этом гидрофильные                  полимеризации   акриламида     и      метилен-бис-акриламида.
свойства и способность к быстрому набуханию в водной               Изменяя соотношение между этими двумя полимерами,
среде. Варьируя число поперечных сшивок, можно получить            удается получить гели с различной степенью пористости. По
несколько различных типов сефадексов, различающихся                своим свойствам они очень близки к декстриновым и
степенью пористости частиц, что позволит применять их для          агарозным гелям — стабильны в водных буферах в
разделения веществ с различными размерами молекул. Гели            интервале значений рН от 1 до 10, практически нейтральны и
сефадекса нерастворимы и стабильны в воде, солевых                 обладают одинаковой способностью связывать воду.
растворах     и органических     растворителях,   а    также   в         При   гель-фильтрации        гель   действует   подобно
щелочных и слабокислых растворах.                                  «молекулярному» ситу, разделяя молекулы в зависимости от
      Агарозные гели готовят из агара — линейного                  молекулярной массы и размера. Матрица представляет собой
полисахарида, состоящего из чередующихся остатков D-               множество пористых частиц, между которыми находится
галактозы и 3,6-ангидро-Z-галактозы. Свойства гелей им             элюент. Если в верхнюю часть колонки (см. рис. 6) внести
придают водородные меж- и внутримолекулярные связи.                анализируемую смесь, то большие молекулы не смогут войти
Благодаря своей гидрофильной природе и почти полному               в поры и будут выходить первыми. Молекулы меньшего
отсутствию заряженных групп агарозные гели подобно                 размера, имеющие доступ к порам, задерживаются на
декстриновым лишь в первоначальной степени вызывают                некоторое время в геле и поэтому выходят после больших
денатурацию     и   адсорбцию     лабильных     биохимических      молекул в порядке уменьшения молекулярной массы и
соединений. Агарозные гели отличаются высокой степенью             размера.
пористости,     хорошо   дополняют      декстриновые.       Они          На    практике   часто    возникает      необходимость
                                                                   сконцентрировать водные растворы макромолекул и удалить