Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 22 стр.

UptoLike

Рубрика: 

Разрыв связей может происходить за счет действия
агента, связывающегося с молекулой вместо лиганда, или
агента, способного связываться с лигандом вместо молекулы.
В обоих случаях элюирование называется специфическим.
Ковалентная хроматография представляет собой вид
хроматографии по неизбирательному сродству, при которой
матрица, богатая сульфгидрильными SH-группами и
активированная путем обмена сульфгидрильных и
дисульфидных групп, избирательно связывает все вещества,
тоже содержащие SH-группы, посредством образования
смешанного дисульфида.
Так как реакция присоединения обратимая, то
продукт, содержащий SH-группы, может быть элюирован
при восстановлении дисульфидной связи после удаления
незафиксированных веществ отмывкой.
Эту хроматографию можно применять во всех
случаях, когда белки и частицы содержат сульфгидрильные
группы, чтобы их изолировать, разделить и удержать
(закрепить).
ЭЛЕКТРОФОРЕЗ
Электрофорезэто движение частиц, находящихся во
взвешенном состоянии в жидкой или газообразной среде, под
действием электрического поля. По общему правилу
подвижность молекул и частиц при электрофорезе
предопределяется только потенциалом их поверхности и не
зависит от их размера и формы. Во время передвижения
частицы подвержены действию антагонистических сил, одни
из которых зависят от их заряда и величины поля, вынуждая
частицы перемещаться, другие связаны с формой частиц и с
характеристиками среды и носителя, оказывая тормозящее
действие. Данный метод можно применять для разделения
белков, так как молекулы амфотерны.
В процессе перемещения на молекулу (сферу)
действуют силы трех типов (рис. 7):
+ Е
Рис.7. Силы, действующие на белки при электрофорезе
      Разрыв связей может происходить за счет действия                           ЭЛЕКТРОФОРЕЗ
агента, связывающегося с молекулой вместо лиганда, или
                                                                   Электрофорез—это движение частиц, находящихся во
агента, способного связываться с лигандом вместо молекулы.
                                                             взвешенном состоянии в жидкой или газообразной среде, под
В обоих случаях элюирование называется специфическим.
                                                             действием   электрического    поля.    По    общему    правилу
       Ковалентная хроматография представляет собой вид
                                                             подвижность    молекул    и   частиц       при   электрофорезе
 хроматографии по неизбирательному сродству, при которой
                                                             предопределяется только потенциалом их поверхности и не
 матрица,   богатая     сульфгидрильными   SH-группами   и
                                                             зависит от их размера и формы. Во время передвижения
 активированная       путем   обмена   сульфгидрильных   и
                                                             частицы подвержены действию антагонистических сил, одни
 дисульфидных групп, избирательно связывает все вещества,
                                                             из которых зависят от их заряда и величины поля, вынуждая
 тоже содержащие SH-группы, посредством образования
                                                             частицы перемещаться, другие связаны с формой частиц и с
 смешанного дисульфида.
                                                             характеристиками среды и носителя, оказывая тормозящее
       Так как реакция присоединения обратимая, то
                                                             действие. Данный метод можно применять для разделения
 продукт, содержащий SH-группы, может быть элюирован
                                                             белков, так как молекулы амфотерны.
 при восстановлении дисульфидной связи после удаления
                                                                   В процессе     перемещения      на    молекулу   (сферу)
 незафиксированных веществ отмывкой.
                                                             действуют силы трех типов (рис. 7):
       Эту хроматографию можно применять во всех
                                                                   +                        Е                          –
 случаях, когда белки и частицы содержат сульфгидрильные
 группы, чтобы их изолировать, разделить и удержать
 (закрепить).




                                                              Рис.7. Силы, действующие на белки при электрофорезе