Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 23 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

1) притягивающие силы электрического поля
F
1
= + n
е
E,
где, n
е
-
эффективный электрический заряд частицы; Е —
электрическое поле;
2) гидродинамические силы
F
2
=6 πηαV
1
,
где η— вязкость среды; α— радиус или другое выражение
размера частиц; V
1
— предельная скорость частицы при
электрофорезе;
3) силы электрофорезного трения, вызываемые
движением в обратном направлении ионов, имеющих заряд,
противоположный заряду частицы:
F
3
= E(έρα – n
e
),
где έ — диэлектрическая постоянная среды; р — потенциал
частицы на ее поверхности.
При ограничении скорости перемещения
F
1
+ F
2
+ F
3
=0
получают значение электрофоретической подвижности, т. е.
совокупной скорости:
U=V/E=έρ/6 πη.
Из формулы видно, что перемещение молекул зависит
от прилагаемого напряжения, ионной силы буферного
раствора и времени.
Другой наиболее употребляемый тип электрофореза
осуществляется на носителе: это классические носители для
хроматографического разделения (бумага, ацетат целлюлозы,
гели из крахмала и полиакриламида), выбираемые в
соответствии с характеристиками (размер, форма) молекул,
подлежащих разделению, и их собственными параметрами
структуры (пористость, вязкость).
В некоторых случаях белки можно также разделить по
их изо-электрическим точкам (р1), т. е.
электрофокусированием. Если заставить белки мигрировать
в среде, имеющей градиент рН, то каждый белок остановится
в той зоне, где рН будет равен его изоэлек-трической точке.
Для этого используют смесь амфолитов — низко-
молекулярных носителей под воздействием разности
потенциалов при условии отсутствия конвекционного тока в
растворе. Белки, представляющие собой
высокомолекулярные амфолиты, концентрируются в узких
зонах соответствующих им рI.
Для получения наиболее точных и достоверных
результатов часто комбинируют различные методы, 
      1) притягивающие силы электрического поля                       Из формулы видно, что перемещение молекул зависит
                          F1 = + nеE,                           от прилагаемого напряжения, ионной силы буферного
где, nе - эффективный электрический заряд частицы; Е —          раствора и времени.
электрическое поле;                                                   Другой наиболее употребляемый тип электрофореза
                                                                осуществляется на носителе: это классические носители для
      2) гидродинамические силы
                                                                хроматографического разделения (бумага, ацетат целлюлозы,
                        F2=6 πηαV1 ,
                                                                гели из крахмала и полиакриламида), выбираемые в
где η— вязкость среды; α— радиус или другое выражение           соответствии с характеристиками (размер, форма) молекул,
размера частиц; V1 — предельная скорость частицы при            подлежащих разделению, и их собственными параметрами
электрофорезе;                                                  структуры (пористость, вязкость).
      3)   силы   электрофорезного       трения,   вызываемые         В некоторых случаях белки можно также разделить по
движением в обратном направлении ионов, имеющих заряд,          их     изо-электрическим       точкам      (р1),        т.       е.
противоположный заряду частицы:                                 электрофокусированием. Если заставить белки мигрировать
                        F3 = E(έρα – ne),                       в среде, имеющей градиент рН, то каждый белок остановится
где έ — диэлектрическая постоянная среды; р — потенциал         в той зоне, где рН будет равен его изоэлек-трической точке.
частицы на ее поверхности.                                      Для   этого   используют     смесь   амфолитов      —        низко-
                                                                молекулярных     носителей    под    воздействием       разности
      При ограничении скорости перемещения
                                                                потенциалов при условии отсутствия конвекционного тока в
                       F1 + F2 + F3 =0                          растворе.        Белки,        представляющие                собой
получают значение электрофоретической подвижности, т. е.        высокомолекулярные амфолиты, концентрируются в узких
совокупной скорости:                                            зонах соответствующих им рI.
                                                                      Для получения наиболее точных и достоверных
                       U=V/E=έρ/6 πη.
                                                                результатов    часто   комбинируют      различные       методы,

Страницы