Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 19 стр.

колонку пропускают буферный раствор, рН и ионную силу                 белков широко используют модифицированную целлюлозу.
которого    постепенно   повышают,      смешивая       в    особой    Последняя служит хорошим ионообменником, так как имеет
градиентной камере 1 растворы с различными значениями                 волокнистую структуру, а также потому, что большинство
рН и ионной силы. К выходящему из колонки элюату до-                  функциональных групп у нее расположено на поверхности
бавляют краситель, например нингидрин, и насыщают                     волокон,    в   результате   чего   они     легко   достигают
азотом; газ пропускают осторожно, чтобы не происходило                макромолекул. Особенно хорошим катионообменником яв-
слишком     интенсивного         перемешивания     элюируемых         ляется     карбоксиметилцеллюлоза     (КМ-целлюлоза),        к
веществ. Смесь нагревают на масляной бане 5 до получения              эффективным       анионообменникам        относится      также
интенсивного окрашивания, затем охлаждают, пропуская                  диэтиламиноэтилцел-люлоза (ДЭАЭ-целлюлоза).
через змеевик 6, и колориметрируют в колориметре при 570                       Проникающая хроматография. Разделение молекул
нм   для    измерения     интенсивности        синей       окраски,   по размерам и форме основано на свойствах молекулярного
обусловленной реакцией аминокислоты с нингидрином.                    сита, которыми обладают многие пористые материалы.
Колориметр связан с двухканальным самописцем 9, который               Наиболее часто для этой цели используют органические
постоянно    регистрирует    выход     элюата     из       колонки.   полимеры с трехмерной сетчатой структурой, придающей им
Аминокислоты     пролин      и     оксипролин    окрашиваются         свойства гелей. Разделение веществ при помощи гелей,
нингидрином в желтый цвет, поэтому их пропускают через                основанное на различиях в размере молекул, называется
второй колориметр 8, настроенный на 440 нм, который также             гель-фильтрацией. К материалам для проникающей хромато-
соединен с самописцем 9. Многие аминокислоты имеют две                графии относятся гели, в том числе и декстрины, с
колонки для отделения смеси аминокислот от аммиака. В                 поперечными     сшивками     (сефадексы),    агарозные    гели
настоящее    время   созданы       различные      современные         (сефарозы, биогель А, са-гавак), полиакриламидный гель
конструкции прибора.                                                  (биогель Р), полиакрило-ил-морфин и полистеролы (БИО-
      Для       разделения         методом       ионообменной         Бидз S), пористые стеклянные шарики (гранулы), известные
хроматографии высокомолекулярных соединений, например,                под названием биоглас, пористый кварц— порасил.