Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 12 стр.

UptoLike

Рубрика: 

Хроматографическая бумага обладает свойствами поглощать
воду из атмосферы и задерживать ее между своими
целлюлозными волокнами. Одним из растворителей является
воданеподвижная фаза. Под действием капиллярных сил
бумаги движется неводный растворительподвижная фаза.
Молекулы вещества, нанесенного на бумагу, распределяются
между фазами в соответствии с их коэффициентом
распределения Rf.
Rf = S
раств
/ S
фp
где S
раств
расстояние, пройденное растворенным
соединением;
S
фp
расстояние, пройденное фронтом
растворителя.
Чем выше растворимость вещества в подвижной фазе,
тем дальше оно продвинется на бумаге вместе с
растворителем, и наоборот.
При использовании хроматографии на колонке в
качестве носителя часто применяют целлюлозу, крахмал,
кремниевую кислоту или какие-либо другие соединения. При
этом неподвижная фаза, как правило, является водной
(некоторые из них содержат до 50 % воды).
Гидратированный носитель смешивают с растворителем до
образования суспензии. Суспензию помещают в колонку,
разделяемую смесь наносят сверху и проводят
хроматографию. Вещества с разными эффективными
коэффициентами распределения движутся по колонке с
разными скоростями и поэтому элюируются в разное время,
что дает возможность собирать и анализировать состав
смесей частиц.
Хроматографию на бумаге проводят восходящими и
нисходящими способами (см. рис. 1).
Рис. 1. Восходящая (а) и нисходящая (б) хроматография
на бумаге:
1 — крышка; 2 — держатель; 3 — зажим; 4— бумага;
5— стеклянная камера; 6— растворитель; 7— стеклянная
палочка; 8— лоток с растворителем; 9— место нанесения
пробы
В обоих случаях на дно герметичного стеклянного
резервуара наливают растворитель для насыщения
Хроматографическая бумага обладает свойствами поглощать                        разделяемую      смесь   наносят    сверху     и    проводят
воду из атмосферы и задерживать ее между своими                                хроматографию.     Вещества   с    разными   эффективными
целлюлозными волокнами. Одним из растворителей является                        коэффициентами распределения движутся по колонке с
вода — неподвижная фаза. Под действием капиллярных сил                         разными скоростями и поэтому элюируются в разное время,
бумаги движется неводный растворитель — подвижная фаза.                        что дает возможность собирать и анализировать состав
Молекулы вещества, нанесенного на бумагу, распределяются                       смесей частиц.
между    фазами       в    соответствии       с     их    коэффициентом              Хроматографию на бумаге проводят восходящими и
распределения Rf.                                                              нисходящими способами (см. рис. 1).
                                Rf = Sраств / Sфp
  где Sраств — расстояние, пройденное растворенным
соединением;
          Sфp     —        расстояние,        пройденное            фронтом
растворителя.

        Чем выше растворимость вещества в подвижной фазе,
тем   дальше     оно       продвинется        на       бумаге   вместе     с
растворителем, и наоборот.
        При использовании хроматографии на колонке в                           Рис. 1. Восходящая (а) и нисходящая (б) хроматография
качестве носителя часто применяют целлюлозу, крахмал,                          на бумаге:
                                                                                  1 — крышка; 2 — держатель; 3 — зажим; 4— бумага;
кремниевую кислоту или какие-либо другие соединения. При                        5— стеклянная камера; 6— растворитель; 7— стеклянная
этом неподвижная фаза, как правило, является водной                             палочка; 8— лоток с растворителем; 9— место нанесения
                                                                                                        пробы
(некоторые      из        них     содержат        до     50     %     воды).
Гидратированный носитель смешивают с растворителем до                                В обоих случаях на дно герметичного стеклянного
образования суспензии. Суспензию помещают в колонку,                           резервуара    наливают    растворитель   для       насыщения