Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 10 стр.

UptoLike

Рубрика: 

перистальтического насоса. Образец рекомендуется вносить
в небольшом объеме растворителя. Это позволяет
сосредоточить разделяемые частицы в узкой полосе уже в
самом начале разделения.
Скорость протекания элюирующего раствора через
колонку в ходе разделения должна быть постоянной, что
достигается при подаче его на колонку самотеком из
резервуара, расположенного над колонкой. Однако при
соблюдении мер предосторожности можно использовать и
перистальтический насос.
Элюат с колонки собирают в виде небольших фракций
(2—5 % общего объема колонки) с помощью
автоматических коллекторов или вручную. Фракции,
содержащие одно и то же соединение, объединяют и
анализируют.
Адсорбционная и распределительная
хроматографии. В основе этих методов лежит явление
полярности.
Адсорбционная хроматография впервые была
применена М. С. Цветом для разделения окрашенных
веществ. Адсорбенттвердое вещество, способное
удерживать на своей поверхности молекулы благодаря
большому количеству мелких пор. В отличие от
ионообменных смол притяжение молекул к поверхности
адсорбента в идеальных условиях не является
электростатическим. Сорбция веществ специфична, что
позволяет избирательно адсорбировать одно вещество из
смеси. В основе разделения методом адсорбционной
хроматографии лежат различия в степени адсорбции данных
веществ адсорбентом и растворимости их в соответ-
ствующем растворителе. Эти свойства определяются в
основном молекулярной структурой соединения.
Адсорбционную хроматографию проводят на колонке
или на специальных пластинах (тонкослойная
хроматография). Последняя применяется для анализа очень
малых количеств вещества.
Колонку заполняют адсорбентом и на него наносят
смесь разделяемых веществ.
Разделение осуществляется за счет того, что вещества
с более высоким эффективным коэффициентом
распределения продвигаются по колонке с большей
скоростью, отделяясь при этом от веществ с более низким
коэффициентом. Если исследуемые соединения окрашены,
то при разделении можно видеть движение по колонке
окрашенных полос. После разделения колонку сушат, зоны
вырезают и элюируют из них вещества. Другой наиболее
перистальтического насоса. Образец рекомендуется вносить                 ионообменных смол притяжение молекул к поверхности
в   небольшом       объеме       растворителя.       Это   позволяет     адсорбента      в     идеальных     условиях       не   является
сосредоточить разделяемые частицы в узкой полосе уже в                   электростатическим. Сорбция веществ специфична, что
самом начале разделения.                                                 позволяет избирательно адсорбировать одно вещество из
       Скорость протекания элюирующего раствора через                    смеси. В основе         разделения методом адсорбционной
колонку в ходе разделения должна быть постоянной, что                    хроматографии лежат различия в степени адсорбции данных
достигается при подаче его на колонку самотеком из                       веществ адсорбентом и растворимости их в соответ-
резервуара, расположенного над колонкой. Однако при                      ствующем растворителе. Эти свойства определяются в
соблюдении мер предосторожности можно использовать и                     основном молекулярной структурой соединения.
перистальтический насос.                                                        Адсорбционную хроматографию проводят на колонке
       Элюат с колонки собирают в виде небольших фракций                 или     на      специальных        пластинах       (тонкослойная
(2—5       %     общего      объема       колонки)     с   помощью       хроматография). Последняя применяется для анализа очень
автоматических       коллекторов        или   вручную.     Фракции,      малых количеств вещества.
содержащие одно и то же соединение, объединяют и                                Колонку заполняют адсорбентом и на него наносят
анализируют.                                                             смесь разделяемых веществ.
       Адсорбционная                и          распределительная                Разделение осуществляется за счет того, что вещества
хроматографии. В основе этих методов лежит явление                       с     более     высоким     эффективным        коэффициентом
полярности.                                                              распределения       продвигаются    по   колонке    с   большей
       Адсорбционная          хроматография          впервые      была   скоростью, отделяясь при этом от веществ с более низким
применена М. С. Цветом для разделения окрашенных                         коэффициентом. Если исследуемые соединения окрашены,
веществ.       Адсорбент     —    твердое     вещество, способное        то при разделении можно видеть движение по колонке
удерживать на своей поверхности молекулы благодаря                       окрашенных полос. После разделения колонку сушат, зоны
большому        количеству       мелких     пор.   В    отличие     от   вырезают и элюируют из них вещества. Другой наиболее