Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 9 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

равновесного распределения между неподвижной
жидкой и подвижной жидкой фазами
(хроматография на колонке или на бумаге и
противоточная хроматография);
равновесного распределения между неподвижной
жидкой и подвижной газовой фазами
(газожидкостная хроматография);
ионообменного равновесия между ионообменной
смолой (неподвижной фазой) и электролитом
(подвижной фазой) — ионообменная
хроматография;
равновесия между жидкой фазой на внутренней и
внешней поверхностях пористой структуры
(проникающая хроматография).
Известны и другие подходы при разделении белков.
Некоторые из них будут предложены к рассмотрению ниже.
Большинство хроматографических методов удобно
проводить на специальных колонках, что явилось причиной
их необычайной популярности в практике определения
различных веществ.
Независимо от метода хроматографии при работе на
колонках используют общие приемы.
Стеклянная хроматографическая колонка должна быть
устроена так, чтобы неподвижная фаза доходила до самого
ее дна во избежание скопления и перемешивания уже
разделившихся частиц. Для этого чаще всего в основание
колонок впаивают пористую стеклянную пластинку,
наслаивают съемную сетку из нейлона и наносят
неподвижную фазу. Известен и более простой способ под-
готовки колонок к работе, заключающийся в том, что
основание колонки заполняют пористым материалом,
например стекловатой, и точно по размеру диаметра колонки
вырезают кружок фильтровальной бумаги, который
аккуратно помещают сверху, а затем наносят неподвижную
фазу (твердый носитель).
После заполнения колонок для уплотнения
содержимого колонки пропускают растворитель. От
правильного выбора соотношения между высотой колонки и
диаметром, высотой и общим объемом наполнителя зависит
количество материала, которое можно разделить. Например,
для эффективного разделения частиц методом гель-
фильтрации соотношение высоты колонки и ее диаметра
лежит в пределах 10 :1 — 20 :1.
Образец наносят непосредственно на поверхность
наполнителя при помощи капилляра, шприца или 
      равновесного распределения между неподвижной                  Стеклянная хроматографическая колонка должна быть
        жидкой       и   подвижной       жидкой      фазами    устроена так, чтобы неподвижная фаза доходила до самого
        (хроматография на колонке или на бумаге и              ее дна во избежание скопления и перемешивания уже
        противоточная хроматография);                          разделившихся частиц. Для этого чаще всего в основание
      равновесного распределения между неподвижной            колонок     впаивают    пористую      стеклянную        пластинку,
        жидкой       и   подвижной       газовой     фазами    наслаивают     съемную     сетку     из    нейлона     и   наносят
        (газожидкостная хроматография);                        неподвижную фазу. Известен и более простой способ под-
      ионообменного равновесия между ионообменной             готовки колонок к работе, заключающийся в том, что
        смолой (неподвижной фазой) и электролитом              основание     колонки    заполняют        пористым    материалом,
        (подвижной       фазой)      —       ионообменная      например стекловатой, и точно по размеру диаметра колонки
        хроматография;                                         вырезают     кружок     фильтровальной        бумаги,      который

      равновесия между жидкой фазой на внутренней и           аккуратно помещают сверху, а затем наносят неподвижную

        внешней      поверхностях    пористой      структуры   фазу (твердый носитель).

        (проникающая хроматография).                                 После     заполнения       колонок       для     уплотнения

     Известны и другие подходы при разделении белков.          содержимого     колонки     пропускают        растворитель.     От

Некоторые из них будут предложены к рассмотрению ниже.         правильного выбора соотношения между высотой колонки и

     Большинство хроматографических методов удобно             диаметром, высотой и общим объемом наполнителя зависит

проводить на специальных колонках, что явилось причиной        количество материала, которое можно разделить. Например,

их необычайной популярности в практике определения             для   эффективного      разделения    частиц     методом      гель-

различных веществ.                                             фильтрации соотношение высоты колонки и ее диаметра

Независимо от метода хроматографии при работе на               лежит в пределах 10 :1 — 20 :1.

колонках используют общие приемы.                                    Образец наносят непосредственно на поверхность
                                                               наполнителя     при     помощи     капилляра,        шприца    или

Страницы