Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 11 стр.

предпочтительный       способ    заключается    в     том,    что   уровня растворителя.    Затем     камеру    снова накрывают
растворитель пропускают через колонку до тех пор, пока не           крышкой, растворитель поднимается вверх по пластинке, и
соберут все фракции по мере их выхода. Если фракции не              таким образом происходит разделение.
окрашены, весь выходящий из колонки материал собирают в                     Многие фирменные адсорбенты для ТСХ содержат
виде фракций, а затем их анализируют. Эффективность                 флуоресцирующие красители. После разделения пластинки
разделения   зависит    от   природы     адсорбента.    Обычно      просматривают в ультрафиолетовом свете, и отдельные
применяют кремниевую кислоту, окись алюминия, карбонат              компоненты выявляются на них в виде синих, зеленых или
кальция, карбонат цинка, окись магния и др.                         темных пятен. Эти пятна соскабливают, а затем элюируют с
      При    тонкослойной       хроматографии       (ТСХ)    слой   помощью      специфических    растворителей,    вымывающих
адсорбента наносят на стеклянные пластинки. В отличие от            соединения, но не растворяющих краситель. Это особенно
классической хроматографии применяемые адсорбенты ТСХ               важно в количественном анализе. Если адсорбенты не
содержат связывающие агенты, например сульфат кальция.              содержат красителей, то при опрыскивании пластинок
Адсорбент наносится в виде кашицеобразной суспензии,                раствором серной кислоты с массовой долей 50 % и
затем пластины высушивают при 100—120 °С. Пробы в виде              последующем их нагревании большинство соединений
пятна наносят на пластинку при помощи микропипетки или              обугливается. На пластинке появляются коричневые пятна.
шприца на расстоянии 2,5 см от нижнего края и боковых               Затем    пластинки   просматривают     в     УФ-свете     либо
сторон и высушивают. Разделение проводят в специальной              анализируют каким-либо другим методом.
камере, на дно которой наливают растворитель слоем 1,5см,                   Метод распределительной хроматографии основан на
затем закрывают стеклянной крышкой и оставляют на 1 ч для           распределении между двумя жидкими фазами. Метод имеет
насыщения камеры парами растворителя. По достижении                 две основные разновидности: хроматография на колонке или
равновесия   снимают      крышку     и   хроматографическую         на бумаге.
пластинку помещают в камеру. Для этого ее устанавливают                     Хроматография        на   бумаге.      Основана     на
вертикально так, чтобы место нанесения пробы было выше              распределении соединения между двумя жидкими фазами.