Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 29 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ПО ТЕМЕ:
«БЕЛКИ»
Лабораторная работа: Обессоливание белкового
раствора методом гель-фильтрации
Низкомолекулярные вещества из белкового раствора
можно удалить достаточно быстро и полно с помощью
гель-фильтрации. Принцип, лежащий в основе этого
метода, весьма прост. Хроматографическую колонку
заполняют гелем, набухшим в воде или буферном растворе.
Разделение веществ основано на различии размеров
молекул. Крупные молекулы не проникают в поры гранул геля
и выходят из колонки в первую очередь, а небольшие
молекулы через поры попадают в гранулы, вследствие чего
задерживаются на колонке и движутся с меньшей
скоростью (рис. 1, а). Метод гель-фильтрации часто
называют разделением веществ по принципу молекулярного
сита. Три стадии такого разделения показаны на рис. 9 (б, в,
г).
Свойствами молекулярного сита обладают многие
пористые материалы. Наиболее часто для этой цели
применяют органические полимеры с трехмерной сетчатой
структурой: например, гели полисахарида декстрана
(коммерческое название
Гранулы геля а
Рис. 9. Разделение веществ методом гель-фильтрации
(схема).
"сефадексы"). При изготовлении сефадексов
полисахаридные цепи декстрана соединяются поперечными
сшивками. Существует несколько типов сефадексов,
различающихся как размером и количеством пор, так и
величиной гранул. Это позволяет применять их для
разделения веществ с молекулами разного размера.
Благодаря высокому содержанию гидроксильных групп
гранулы сефадекса легко набухают, образуя гель. Чем выше
скорость набухания геля, тем больше номер сефадекса. Для 
          ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ПО ТЕМЕ:                         структурой:      например,    гели   полисахарида     декстрана
                         «БЕЛКИ»                               (коммерческое название

      Лабораторная работа: Обессоливание белкового
           раствора методом гель-фильтрации

      Низкомолекулярные вещества из белкового раствора
можно удалить достаточно быстро и полно с помощью
гель-фильтрации. Принцип, лежащий в основе этого
метода,   весьма    прост.   Хроматографическую     колонку
                                                               Гранулы геля а
заполняют гелем, набухшим в воде или буферном растворе.
                                                                 Рис. 9. Разделение веществ методом гель-фильтрации
      Разделение веществ основано на различии размеров
                                                                                            (схема).
молекул. Крупные молекулы не проникают в поры гранул геля
и выходят из колонки в первую очередь, а небольшие
                                                               "сефадексы").        При        изготовлении        сефадексов
молекулы через поры попадают в гранулы, вследствие чего
                                                               полисахаридные цепи декстрана соединяются поперечными
задерживаются      на   колонке и   движутся    с меньшей
                                                               сшивками.     Существует      несколько    типов    сефадексов,
скоростью (рис. 1, а). Метод гель-фильтрации часто
                                                               различающихся как размером и количеством пор, так и
называют разделением веществ по принципу молекулярного
                                                               величиной гранул. Это позволяет применять их для
сита. Три стадии такого разделения показаны на рис. 9 (б, в,
                                                               разделения    веществ    с    молекулами    разного    размера.
г).
                                                               Благодаря высокому содержанию гидроксильных групп
      Свойствами молекулярного сита обладают многие            гранулы сефадекса легко набухают, образуя гель. Чем выше
пористые материалы. Наиболее часто для этой цели               скорость набухания геля, тем больше номер сефадекса. Для
применяют органические полимеры с трехмерной сетчатой

Страницы