Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 43 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

IV. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ УЧЕТ МИКРООРГАНИЗМОВ
Методы определения количества микроорганизмов могут быть пря-
мыми (подсчет клеток под микроскопом, взвешивание на весах) или кос-
венными, посредством которых определяют число колоний микроорганиз-
мов, выросших после высева суспензии клеток на питательную среду, рас-
сеяние или поглощение суспензией клеток света, содержание в ней белка и
др. Выбор метода зависит от целей исследования, свойств питательной
среды или субстрата, а также особенностей роста и морфологии микроор-
ганизмов.
1. Подсчет клеток микроорганизмов под микроскопом
Подсчитать клетки микроорганизмов под микроскопом можно ис-
пользуя счетные камеры, капилляры Перфильева, препараты фиксирован-
ных и окрашенных клеток, приготовленные на предметных стеклах или
мембранных фильтрах. Перечисленные методы позволяют определить
общее количество клеток в единице объема. Следует помнить, что под-
считывают все клетки, как живые, так и мертвые.
Подсчет клеток в счетных камерах. Этот метод рекомендуется
использовать для подсчета крупных объектов - дрожжей, одноклеточных
водорослей, конидий грибов и некоторых относительно крупных бактерий.
Обычно используют камеру Горяева - Тома, хотя можно применять и дру-
гие счетные камеры. При работе с камерой необходимо соблюдать опреде-
ленный порядок ее заполнения. Вначале углубление с сеткой покрывают
специальным шлифованным покровным стеклом и, слегка прижимая, сме-
щают покровное стекло в противоположные стороны до появления колец
Ньютона. Эти кольца указывают на то, что покровное стекло притерто к
сторонам камеры. Только при таком условии объем взвеси микроорганиз-
мов, находящийся в камере, соответствует расчетному. После этого камеру
заполняют исследуемой суспензией микроорганизмов. Суспензию вносят
через бороздку камеры капилляром или пипеткой. Подсчет клеток реко-
мендуется начинать через 3 - 5 мин после заполнения камеры, чтобы клет-
43