Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 45 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

промывают, последовательно погружая стекло в 4 - 5 стаканов с водой
(промывать препарат под струѐй водопроводной воды не следует), и вы-
сушивают на воздухе. В таком виде препараты хорошо сохраняются.
Количество клеток подсчитывают с иммерсионным объективом в
квадратах окулярной сетки, которую помещают в окуляр между собира-
тельной и глазной линзами. При отсутствии сетки подсчитывают число
клеток в поле зрения микроскопа. Чтобы результат был достоверным,
клетки микроорганизмов рекомендуется подсчитывать в 50 - 100 полях
зрения. Общее количество подсчитанных клеток не должно быть менее
600. Количество клеток микроорганизмов, содержащихся в 1 мл исследуе-
мого субстрата, вычисляют по формуле
»
AS
М = ---- п,
sV где М -
количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата;
А - среднее число клеток в квадрате окулярной сетки (поле зрения);
s - площадь квадрата окулярной сетки (поля зрения), мкм
2
;
V - объем нанесенной на стекло суспензии, мл;
S - площадь приготовленного мазка, мкм ;
п - разведение исследуемого субстрата.
Подсчет клеток на мембранных фильтрах. Этот метод применяют
при определении количества микроорганизмов в различных водоемах, при
санитарно-бактериологических и некоторых других исследованиях.
Фильтрование пробы определенного объема (от нескольких миллилитров
до десятков литров) позволяет сконцентрировать на поверхности фильтра
содержащиеся в пробе клетки микроорганизмов. Затем их окрашивают и
подсчитывают.
2. Определение количества клеток высевом на плотные
питательные среды (чашечный метод Коха)
В основе метода лежит принцип Коха, согласно которому каждая ко-
лония является потомством одной клетки. Это позволяет на основании
числа колоний, выросших после посева на плотную питательную среду
определенного объема исследуемой суспензии, судить об исходном содер-
жании в ней клеток микроорганизмов. Результаты количественного учета
микроорганизмов, проведенного методом Коха, часто выражают не в числе
клеток, а в условных единицах - так называемых колониеобразующих еди-
ницах (КОЕ).
45