Лабораторный практикум по общей микробиологии. Прунтова О.В - 46 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

Определение числа микроорганизмов этим методом включает три
этапа: приготовление разведений, посев на плотную среду в чашки Петри и
подсчет выросших колоний.
Посев. Высевать суспензию можно поверхностным или глубинным
способом. Перед посевом поверхностным способом разливают расплавлен-
ную, чаще всего агаризованную, питательную среду в ряд стерильных чашек
Петри по 15 - 20 мл в каждую. Чашки оставляют на горизонтальной поверх-
ности, пока среда не застынет. Поверхность агаризованных сред перед посе-
вом рекомендуется подсушивать для удаления конденсационной воды.
После того как среда готова, на ее поверхность стерильной пипеткой
наносят точно измеренный объем (0,05 или 0,1 мл) соответствующего раз-
ведения и равномерно распределяют по поверхности среды.
При глубинном посеве точно измеренный объем ак правило, 0,1; 0,5
или 1,0 мл) исходной суспензии или разведения вносят в расплавленную и
остуженную до 48 - 50 °С агаризованную среду, тщательно перемешивают и
затем немедленно выливают в чашку Петри. Среде дают застыть.
Подсчет выросших колоний. Колонии микроорганизмов в зависи-
мости от скорости роста подсчитывают через 2 - 15 сут инкубации. Под-
счет, как правило, проводят, не открывая чашек Петри. Для удобства каж-
дую просчитанную колонию отмечают точкой на наружной стороне дна
чашки. При большом количестве колоний дно чашки Петри делят на сек-
торы, просчитывают колонии в каждом секторе и суммируют результаты.
Результаты учитывают на тех чашках Петри, на которых вырастает от 30 -
50 до 100 - 150 колоний. Если число выросших колоний оказалось меньше
10, то эти результаты для расчета количества клеток в исходном материале
не используют.
Количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата вычисляют по
формуле
V
где М - количество клеток в 1 мл;
а - среднее число колоний на чашке Петри; V
объем суспензии, взятый для посева, мл;
10
n
- коэффициент разведения.
46