ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
Необходимо помнить, что статистическая обработка результатов
возможна только при минимальной технической ошибке.
3. Определение количества клеток и биомассы
нефелометрическим методом
В основе метода лежит измерение уменьшения количества света при
его прохождении через суспензию клеток. В определенных пределах оно и
пропорционально концентрации клеток и обусловлено преимущественно
рассеянием света клетками. Величина этого показателя зависит от многих
факторов (формы и размеров клеток, оптических свойств культуральной
среды, длины волны падающего света и т.д.). Поэтому нефелометрический
метод пригоден лишь для тех микроорганизмов, рост которых вызывает
помутнение среды и не сопровождается заметным изменением формы и
размеров клеток, образованием мицелия, пленок или других скоплений.
Питательная среда, в которой предполагается определять число клеток,
должна быть оптически прозрачной. Изменение интенсивности света при
прохождении через суспензию клеток измеряют с помощью фотоэлектро-
колориметра (ФЭК) или спектрофотометра, выбирая длину волны (обычно
в интервале 540 - 650 нм), при которой поглощение света данной суспен-
зией клеток является минимальным.
4. Стандарты мутности и их применение
В ряде случаев количество клеток в суспензии бывает достаточно
определить визуально путем сравнения со стандартом мутности. Стандар-
ты мутности, выпускаемые государственным НИИ стандартизации и кон-
троля медицинских и биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича,
представляют собой взвесь частиц стекла пирекс в дистиллированной воде.
За единицу стандарта мутности общего назначения условно принята мут-
ность суспензии в физиологическом растворе бактерий - возбудителей ти-
фа с концентрацией клеток 100 млн/мл. Стандарт мутности включает 4
эталона на 10, 11, 9 и 5 единиц, что соответствует содержанию 1-10 ;
1,1-Ю
9
; 0,9-10
9
и 0,5-Ю
9
клеток в 1 мл взвеси. Для определения количества
клеток пробирку с исследуемой суспензией ставят рядом с эталоном 10 и
рассматривают их в отраженном и проходящем свете на фоне белого листа
бумаги, в центре которого нанесено несколько черных линий.
47
Необходимо помнить, что статистическая обработка результатов возможна только при минимальной технической ошибке. 3. Определение количества клеток и биомассы нефелометрическим методом В основе метода лежит измерение уменьшения количества света при его прохождении через суспензию клеток. В определенных пределах оно и пропорционально концентрации клеток и обусловлено преимущественно рассеянием света клетками. Величина этого показателя зависит от многих факторов (формы и размеров клеток, оптических свойств культуральной среды, длины волны падающего света и т.д.). Поэтому нефелометрический метод пригоден лишь для тех микроорганизмов, рост которых вызывает помутнение среды и не сопровождается заметным изменением формы и размеров клеток, образованием мицелия, пленок или других скоплений. Питательная среда, в которой предполагается определять число клеток, должна быть оптически прозрачной. Изменение интенсивности света при прохождении через суспензию клеток измеряют с помощью фотоэлектро- колориметра (ФЭК) или спектрофотометра, выбирая длину волны (обычно в интервале 540 - 650 нм), при которой поглощение света данной суспен- зией клеток является минимальным. 4. Стандарты мутности и их применение В ряде случаев количество клеток в суспензии бывает достаточно определить визуально путем сравнения со стандартом мутности. Стандар- ты мутности, выпускаемые государственным НИИ стандартизации и кон- троля медицинских и биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича, представляют собой взвесь частиц стекла пирекс в дистиллированной воде. За единицу стандарта мутности общего назначения условно принята мут- ность суспензии в физиологическом растворе бактерий - возбудителей ти- фа с концентрацией клеток 100 млн/мл. Стандарт мутности включает 4 эталона на 10, 11, 9 и 5 единиц, что соответствует содержанию 1-10 ; 1,1-Ю9; 0,9-109 и 0,5-Ю9 клеток в 1 мл взвеси. Для определения количества клеток пробирку с исследуемой суспензией ставят рядом с эталоном 10 и рассматривают их в отраженном и проходящем свете на фоне белого листа бумаги, в центре которого нанесено несколько черных линий. 47
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 45
- 46
- 47
- 48
- 49
- …
- следующая ›
- последняя »