Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 15 стр.

вычисляют в программе Microsoft Office Excel (опция «Описательная
статистика»).


              1.4. Определение активности супероксиддисмутазы
     Общую      активность     супероксиддисмутазы       (СОД)    определяли   по
способности     фермента     ингибировать        фотохимическое   восстановление
нитросинего     тетразолия    (NBT),   согласно      Гианнополитису    и   Райсу
(Giannopolitis, Ries, 1977) с некоторыми модификациями, как описано
Полесской с соавторами (Полесская и др., 2004).
                             Необходимые реактивы:
1) 50 мМ K,Na-фосфатный буфер (рН 7,8). Для его приготовления необходимо
сделать следующие сток-растворы:
0,2 М КН2РО4 (1,36 г КН2РО4 растворить в дистиллированной воде и довести
до 50 мл),
0,2 М NaOH (400 мг NaOH растворить в дистиллированной воде и довести до
50 мл).
      Приготовление 50 мМ K,Na-фосфатного буфера, рН 7,8:
     25 мл 0,2 М КН2РО4 и 22,25 мл 0,2 М NaOH смешать и довести до 100 мл
дистиллированной водой. Проверить рН раствора (скорректировать значение с
помощью концентрированной H3PO4 или 5% NaOH).
2) экстракционный буфер (к 2 мл 50 мМ K,Na-фосфатного буфера (рН 7,8)
добавить 20 мкл фенилметилсульфонилфторида (ФМСФ)).
3) 0,025% раствор рибофлавина (2,5 мг рибофлавина растворить в 10 мл
кипящей дистиллированной воды).
4) 0,05% раствор п-нитросинего тетразолия (NBT) (5 мг NBT растворить в 10
мл дистиллированной воды).
5) 0,24% раствор Na-ЭДТА (24 мг Na-ЭДТА растворить в 10 мл
дистиллированной воды).
                                  Ход работы
     Навеску каллусной ткани массой 150-200 мг растереть в охлажденной

                                            15