Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 14 стр.

UptoLike

Рубрика: 

14
A = ((ΔD/T)Х)/(L•С)
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
начале реакции оптическую плотность в конечный момент времени),
X конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
разделить на количество вносимого экстракта),
T – время реакции, с,
L – толщина слоя, мм,
С содержание белка в пробе, мг (см. методику по определения содержания
белка в пробе).
Возможен еще один вариант расчета активности каталазы в
относительных единицах, предложенный Мэйл с соавт. (Mehl et al., 2005):
на грамм сухого веса А = (К•Х)/(m•Δm) (1)
или
на мг белка А = (К•Х)/С (2),
где:
А – активность фермента,
К = (2,3/Т)•[log10(A
1
/A
2
)],
где:
Т – время реакции, мин,
А
1
– оптическая плотность в начальный момент времени,
А
2
– оптическая плотность в конечный момент времени,
разведение отношение объёма используемого образца к общему объёму
реакционной смеси,
mмасса навески, г,
Δm – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),
С – содержание белка в пробе, мг.
Измерение активности каталазы проводят в нескольких (не менее трёх)
биологических и аналитических повторностях. Стандартную ошибку
                                   A = ((ΔD/T)Х)/(L•С)
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
       начале реакции оптическую плотность в конечный момент времени),
X – конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
       разделить на количество вносимого экстракта),
T – время реакции, с,
L – толщина слоя, мм,
С – содержание белка в пробе, мг (см. методику по определения содержания
       белка в пробе).
       Возможен    еще      один   вариант    расчета      активности   каталазы     в
относительных единицах, предложенный Мэйл с соавт. (Mehl et al., 2005):
на грамм сухого веса                         А = (К•Х)/(m•Δm)                      (1)
                                             или
на мг белка                                  А = (К•Х)/С                           (2),
где:
А – активность фермента,
К = (2,3/Т)•[log10(A1/A2)],
где:
Т – время реакции, мин,
А1 – оптическая плотность в начальный момент времени,
А2 – оптическая плотность в конечный момент времени,
разведение – отношение объёма используемого образца к общему объёму
       реакционной смеси,
m – масса навески, г,
Δm – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),
С – содержание белка в пробе, мг.
       Измерение активности каталазы проводят в нескольких (не менее трёх)
биологических     и      аналитических   повторностях.       Стандартную    ошибку

                                             14