Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 38 стр.

UptoLike

Рубрика: 

38
V
96%
= (V
80%
•80)/96,
где:
V
96%
– объём 96% этанола, необходимый для получения нужного объёма 80%
этанола,
V
80%
– необходимый объём 80% этанола,
Выбор растворителя для экстракции определяется исследователем,
исходя из поставленных целей и задач. Следует отметить, что, например, по
сравнению с этанолом метанол экстрагирует фенольные соединения в большей
степени.
Определение суммы фенольных соединений
Для определения оптической плотности можно использовать разные
спектрофотометрические кюветы (стандартные и микро) и, соответственно,
готовить разные объёмы реакционной среды:
Реакционная смесь содержит:
для стандартной кюветы
для микрокюветы
0,5 мл
экстракта
2,5 мл разведенного реактива Фолина-
Чокальтеу
0,1 мл
экстракта
0,5 мл разведенного реактива
Фолина-Чокальтеу
добавить через 3 мин! 2,0 мл Na
2
CO
3
(75 г/л)
добавить через 3 мин! 0,4 мл Na
2
CO
3
(75 г/л)
После добавления раствора Na
2
CO
3
реакционная смесь в разной степени
посинеет.
В контрольные пробирки добавить соответственно по 0,5 или 0,1 мл 80%
этанола. Пробирки с реакционной смесью хорошо встряхнуть и оставить на
2 часа.
Измерение оптической плотности проводить на спектрофотометре при
длине волны 765 нм.
                             V96% = (V80%•80)/96,
где:
V96% – объём 96% этанола, необходимый для получения нужного объёма 80%
       этанола,
V80% – необходимый объём 80% этанола,
       Выбор растворителя для экстракции определяется исследователем,
исходя из поставленных целей и задач. Следует отметить, что, например, по
сравнению с этанолом метанол экстрагирует фенольные соединения в большей
степени.
       Определение суммы фенольных соединений
       Для определения оптической плотности можно использовать разные
спектрофотометрические кюветы (стандартные и микро) и, соответственно,
готовить разные объёмы реакционной среды:


                       Реакционная смесь содержит:
       для стандартной кюветы                       для микрокюветы

 0,5 мл экстракта                         0,1 мл экстракта
 2,5 мл разведенного реактива Фолина-     0,5 мл разведенного реактива
 Чокальтеу                                Фолина-Чокальтеу

 добавить через 3 мин! 2,0 мл Na2CO3      добавить через 3 мин! 0,4 мл Na2CO3
 (75 г/л)                                 (75 г/л)

       После добавления раствора Na2CO3 реакционная смесь в разной степени
посинеет.
       В контрольные пробирки добавить соответственно по 0,5 или 0,1 мл 80%
этанола. Пробирки с реакционной смесью хорошо встряхнуть и оставить на
2 часа.
       Измерение оптической плотности проводить на спектрофотометре при
длине волны 765 нм.



                                        38