Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 37 стр.

голубого цвета. Реактив должен храниться хорошо защищённым от пыли, т.к.
органические вещества постепенно его восстанавливают. Добавление сульфата
лития обусловлено тем, что он предотвращает выпадение в осадок сложных
солей натрия.
     Хранить желательно в бутылке тёмного стекла.
                                  Ход работы
     Приготовить экстракты для определения суммы фенольных соединений.
     Подготовка образцов:
     Выделение    внутриклеточных       фенольных     соединений.     Биомассу
суспензионных или каллусных культур лиофильно высушить и вычислить
сухой вес. Сухую ткань растереть, навеску (50 мг) перенести в плотно
завинчивающиеся пробирки типа "эппендорф", залить 80% этанолом (1,5 мл) и
инкубировать на водяной бане при 80 °С в течение 30 мин. Полученный
экстракт осадить при 12 000 g в течение 10 мин. Супернатант слить в пробирку-
эппендорф объёмом 2 мл. К осадку добавить 0,5-0,7 мл 80% этанола, взболтать
и ещё раз центрифугировать при тех же условиях. Супернатанты объединить,
конечный объём довести до 2 мл.
     Выделение     внеклеточных       фенолов.      Среду   культивирования
отфильтровать или центрифугировать 30 мин при 3000 g. Фиксированный
объём супернатанта лиофильно высушить. Сухой остаток смыть 80% этанолом
(1,5 мл) и экстрагировать на водяной бане при 80 °С в течение 30 минут.
Полученный экстракт осадить при 12 000 g в течение 10 мин. Супернатант
слить в пробирку-эппендорф объёмом 2 мл. К осадку добавить 0,5-0,7 мл 80%
этанола, взболтать и ещё раз центрифугировать при тех же условиях.
Супернатанты объединить, конечный объём довести до 2 мл.
     Выделение     водорастворимых       фенольных      соединений.     Среду
культивирования отфильтровать или центрифугировать 30 мин при 3000 g и
использовать аналогично спиртовым экстрактам.
     Количество 96% этанола для получения необходимого объёма 80%
этанола рассчитывается по формуле:

                                        37