Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 35 стр.

UptoLike

Рубрика: 

35
5 мкМ - 50 мкл из сток-раствора
10 мкМ - 100 мкл из сток-раствора
20 мкМ - 200 мкл из сток-раствора
Далее действуют согласно описанной выше процедуре. По полученным
значениям оптической плотности строят калибровочную кривую в координатах
оптическая плотность-концентрация глутатиона.
Расчёты
Для вычисления концентрации GSH и GSSG используют калибровочные
кривые. Концентрация GSSG определяется по калибровочной кривой,
построенной по известным концентрациям GSSG.
Оптическая плотность для определения содержания GSH рассчитывается
как
ΔD = D
общ
D
GSSG
,
где:
ΔD – оптическая плотность для определения содержания GSH,
D
общ
оптическая плотность, полученная при измерении пробы общего
содержания глутатиона,
D
GSSG
– оптическая плотность пробы, в которой измеряют содержание GSSG.
Далее с помощью полученной оптической плотности концентрацию GSH
определяют по калибровочной кривой, построенной по известным
концентрациям GSH.
Для расчета GSH и GSSG в пробе используют следующую формулу:
К =•V•X)/(m•m),
где:
А – концентрация глутатиона, мкмоль/мл,
V – объём экстракта, мл,
X разведение (если добавлять 100 мкл экстракта при конечном объёме
реакционной смеси 1002 мкл, то разведение будет равно 10,02),
mмасса навески, г,
m – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),
       5 мкМ - 50 мкл из сток-раствора
       10 мкМ - 100 мкл из сток-раствора
       20 мкМ - 200 мкл из сток-раствора
        Далее действуют согласно описанной выше процедуре. По полученным
значениям оптической плотности строят калибровочную кривую в координатах
оптическая плотность-концентрация глутатиона.
                                      Расчёты
        Для вычисления концентрации GSH и GSSG используют калибровочные
кривые. Концентрация GSSG определяется по калибровочной кривой,
построенной по известным концентрациям GSSG.
        Оптическая плотность для определения содержания GSH рассчитывается
как
                                ΔD = Dобщ – DGSSG,
где:
ΔD – оптическая плотность для определения содержания GSH,
Dобщ – оптическая плотность, полученная при измерении пробы общего
          содержания глутатиона,
DGSSG – оптическая плотность пробы, в которой измеряют содержание GSSG.
        Далее с помощью полученной оптической плотности концентрацию GSH
определяют      по    калибровочной      кривой,   построенной   по   известным
концентрациям GSH.
        Для расчета GSH и GSSG в пробе используют следующую формулу:
                               К = (А•V•X)/(m•m),
где:
А – концентрация глутатиона, мкмоль/мл,
V – объём экстракта, мл,
X – разведение (если добавлять 100 мкл экстракта при конечном объёме
      реакционной смеси 1002 мкл, то разведение будет равно 10,02),
m – масса навески, г,
m – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.),

                                            35