Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 39 стр.

UptoLike

Рубрика: 

39
Построение калибровочной кривой
При построении калибровочной кривой используют тот же тип кювет, что
и в эксперименте. Приготовить сток-раствор галловой кислоты 10 мг
галловой кислоты растворить в 20 мл 80% этанола.
Пробирки пометить, имея в виду повторности. В пробирки внести
определённые объёмы сток-раствора галловой кислоты и добавить 80% этанол
в объёмах, необходимых для получения нужной концентрации (см. таблицу).
Концентрация
галловой
кислоты, мг/л
для стандартной кюветы для микрокюветы
Объём сток-
раствора для
приготовления
пробы, мл
Объём 80%
этанола для
приготовления
пробы, мл
Объём сток-
раствора для
приготовления
пробы, мл
Объём 80%
этанола для
приготовления
пробы, мл
Контроль, 0 0,0 0,5 0,0 0,1
25 0,025 0,475 0,005 0,095
50 0,05 0,45 0,01 0,09
100 0,1 0,4 0,02 0,08
150 0,15 0,35 0,03 0,07
200 0,2 0,3 0,04 0,06
250 0,25 0,25 0,05 0,05
Далее в реакционную смесь добавляют в соответствующих количествах
остальные компоненты и проводят измерения, согласно изложенной ранее
процедуре.
По полученным данным строят калибровочную кривую в координатах
оптическая плотность–концентрация галловой кислоты.
Важно! Работа с малыми объёмами реактивов требует большого
внимания и тщательности!
Расчёты
Содержание фенольных соединений в экстракте определить с помощью
калибровочной кривой, построенной по галловой кислоте. Содержание
       Построение калибровочной кривой
       При построении калибровочной кривой используют тот же тип кювет, что
 и в эксперименте. Приготовить сток-раствор галловой кислоты – 10 мг
 галловой кислоты растворить в 20 мл 80% этанола.
       Пробирки пометить, имея в виду повторности. В пробирки внести
 определённые объёмы сток-раствора галловой кислоты и добавить 80% этанол
 в объёмах, необходимых для получения нужной концентрации (см. таблицу).

                   для стандартной кюветы              для микрокюветы
Концентрация Объём сток-     Объём 80%     Объём сток-   Объём 80%
  галловой     раствора для  этанола для   раствора для  этанола для
кислоты, мг/л приготовления приготовления приготовления приготовления
                пробы, мл     пробы, мл     пробы, мл     пробы, мл
 Контроль, 0         0,0             0,5             0,0            0,1

     25             0,025           0,475           0,005          0,095

     50              0,05           0,45            0,01           0,09

    100              0,1             0,4            0,02           0,08

    150              0,15           0,35            0,03           0,07

    200              0,2             0,3            0,04           0,06

    250              0,25           0,25            0,05           0,05


       Далее в реакционную смесь добавляют в соответствующих количествах
 остальные компоненты и проводят измерения, согласно изложенной ранее
 процедуре.
       По полученным данным строят калибровочную кривую в координатах
 оптическая плотность–концентрация галловой кислоты.
       Важно! Работа с малыми объёмами реактивов требует большого
 внимания и тщательности!
                                   Расчёты
          Содержание фенольных соединений в экстракте определить с помощью
 калибровочной кривой, построенной по галловой кислоте. Содержание

                                           39