Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 43 стр.

     По полученным данным построить калибровочную кривую в координатах
% ингибирования ДФПГ–концентрация Trolox.
     По калибровочной кривой определить антиоксидантную активность
экстрактов,     которая     выражается    в     мкМ-экв    Trolox.    Пересчитать
антиоксидантную активность на содержание фенолов в пробе.
     Измерения проводят в нескольких (не менее трёх) биологических и
аналитических повторностях. Стандартную ошибку вычисляют в программе
Microsoft Office Excel (опция «Описательная статистика»).


              3.4. Определение содержания аскорбиновой кислоты
     Количественное определение содержания аскорбиновой кислоты в тканях
проводили с помощью гексацианоферрата калия (Методы биохимического
анализа   растений,       1978).   В   кислой    среде    аскорбиновая      кислота
стехиометрически      восстанавливает    гексацианоферрит     калия      (Fe+3)   до
гексацианоферрата калия (Fe+2), который в присутствии ионов трехвалентного
железа образует гексацианоферат железа (берлинская лазурь). При этом если в
среде присутствуют ионы фтора, то берлинская лазурь не выпадает в осадок, а
получается раствор синего цвета.
                             Необходимые реактивы:
1) 0,1 М цитратный буфер, рН 3,69 (2,26 г цитрата аммония растворить в
100 мл дистиллированной воды. Довести рН раствора концентрированной HCl).
2) 1% раствор K3[Fe(CN)6] (100 мг K3[Fe(CN)6] растворить в 10 мл
дистиллированной воды).
3) 2% раствор NaF (200 мг NaF растворить в 10 мл дистиллированной воды).
4) 2% раствор FeCl3 (200 мг FeCl3 растворить в 10 мл дистиллированной воды).
5) 0,2% раствор аскорбиновой кислоты (4 мг аскорбиновой кислоты растворить
в 2 мл дистиллированной воды).
                                   Ход работы
     Навеску каллусной ткани массой 500 мг растереть в 1 мл буферного
раствора (рН 3,69), перенести в пробирки типа эппендорф, сильно встряхнуть и

                                           43