Витамины и коферменты. Смирнов В.А - 69 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СамГТУ | Самара

Составители: 

Рубрика: 

68
2. ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ
2.1. АНАЛИЗ ВИТАМИНОВ
2.1.1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНОВ ГРУППЫ В
1
Опыт 1. Тиохромная реакция на тиамин
Анализ субстанций. 0,01 г препарата витамина В
1
(тиамин хло-
рид, тиамин бромид, фосфотиамин, кокарбоксилаза) растворяют в 5
мл воды, добавляют 1 мл 5%-ного раствора феррицианида калия
(красная кровяная соль), 1 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия,
5 мл бутилового или изоамилового спирта, хорошо встряхивают и
дают отстояться. В верхнем спиртовом слое возникает наблюдаемая в
ультрафиолетовом свете синяя флюоресценция, исчезающая при под-
кислении и вновь возникающая при подщелачивании раствора.
Анализ таблеток, драже, поливитаминных препаратов. На-
веску растертого препарата, содержащую около 0,01 г витамина В
1
,
встряхивают с 10 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. 5 мл фильт-
рата обрабатывают, как указано выше.
Открытие тиамина в дрожжах. 10 г сухих дрожжей тщатель-
но растирают в ступке, добавляя постепенно 10 мл 0,1М раствора
хлористоводородной кислоты. Суспензию центрифугируют, надоса-
дочный раствор обрабатывают, как указано выше.
Опыт 2. Реакция тиамина с диазореактивом
5-10 мг субстанции витамина В
1
растворяют в 1 мл воды, добавляют
1 мл раствора диазореактива и 2 мл 5%-ного раствора карбоната натрия.
Появляется желтое окрашивание, переходящее через 1-2 мин в красное.
Приготовление раствора диазореактива. В мерную колбу ем-
костью 100 мл помещают 0,90 г сульфаниловой кислоты, 9 мл кон-
центрированной соляной кислоты, 60-70 мл воды, перемешивают и
доводят водой до метки. 5 мл приготовленного раствора помещают в
мерную колбу емкостью 100 мл, поставленную на лед, прибавляют
2,5 мл 10%-ного раствора нитрита натрия и смесь оставляют на льду

Страницы