Витамины и коферменты. Смирнов В.А - 86 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СамГТУ | Самара

Составители: 

Рубрика: 

85
X =
D V
a
100
1850
.
.
.
испр
Опыт 29. Количественное определение витамина А
в тресковом рыбьем жире
Около 1 г жира (точная навеска) помещают в колбу емкостью 100
мл, снабженную обратным холодильником; прибавляют 30 мл спирта,
не содержащего альдегидов, З мл 50%-ного водного раствора гидрокси-
да калия и дефлегмируют смесь 30 мин. Содержимое колбы охлаждают,
добавляют 50 мл воды и переносят в делительную воронку. Смесь экст-
рагируют 50 мл эфира, а затем еще 2 раза по 30 мл эфира. Объединенные
эфирные вытяжки промывают водой по 30-40 мл до нейтральной реак-
ции промывных вод (проба с фенолфталеином). К промытым эфирным
вытяжкам добавляют 8 г безводного сульфата натрия и оставляют на 30
мин в темном месте, периодически встряхивая. Затем фильтруют содер-
жимое через бумажный фильтр в колбу для перегонки. Сульфат натрия
на фильтре промывают несколькими порциями эфира, который фильт-
руют в ту же колбу. Эфир отгоняют в токе азота или аргона на водяной
бане при температуре не выше 50 °С. Неомыляемый остаток растворяют
в абсолютном спирте до получения раствора, содержащего в 1 мл около
3 мкг (8-10 МЕ) витамина А. Измеряют оптическую плотность этого
раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при дли-
нах волн 311 нм; 324,5 нм и 334 нм, применяя в качестве контрольного
раствора абсолютный спирт.
Содержание витамина А в международных единицах (МЕ) в 1 г
жира (Х) вычисляют по формуле
где:
D
испр
= 7·D
324,5
– 2,912·D
311
– 4,088·D
334
(D
324,5
, D
311
, D
334
–– оптические
плотности раствора при соответствующих длинах волн);
а – навеска препарата, г;
V – объём спиртового раствора, приготовленный для фотометрирования,
мл;
1850– коэффициент пересчета в МЕ.
Рыбий жир должен содержать не менее 350 МЕ витамина А в 1 г.

Страницы