Хроматографические методы в анализе лекарственных и токсичных веществ. Стоянова О.Ф - 50 стр.

UptoLike

50
подвижный растворитель. Таким образом , хроматограмму обрабатывают 3
раза.
Затем полоску бумаги высушивают и проявляют хроматограмму
раствором нингидрина (опрыскивают из пульверизатора). Проявленную
хроматограмму нагревают 15-20 мин при 60
о
С в сушильном шкафу.
Расположение зон аминокислот по направлению движения растворителя
( сверху вниз ) следующее: аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота,
валин.
После развития хроматограммы вырезают участки пятен,
занимаемые аминокислотами, сбоку хроматограммы вырезают
контрольные участки, не содержащие аминокислот и равные по площади
зонам определяемых соединений . Вырезанные участки бумаги измельчают
ножницами и помещают в пробирки. В каждую пробирку добавляют по
10 мл элюента, объем доводят до 20 мл этиловым спиртом и встряхивают.
Элюирование происходит в результате образования комплексного
соединения аминокислот с Cu(II) оранжевого цвета, растворимого в
этиловом спирте. Пробирки с элюатами помещают в затемненное место и
оставляют на 1 ч., периодически перемешивают их содержимое .
Количественный анализ . Оптическую плотность экстрактов
измеряют на фотоэлектроколориметре при λ =530 нм . Контрольный
раствор содержит все необходимые реактивы , кроме аминокислот . Строят
градуировочный график в координатах оптическая плотность
концентрация аминокислот, моль/ л. По графику находят концентрацию
аминокислот в анализируемом белковом гидролизате.
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА В ФАРМАЦИИ И
ХИМИКО -ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
Фармация относится к числу наиболее древних естественных наук ,
объектами исследования которой уже в далекие времена были в
большинстве случаев объекты растительного или животного
происхождения . Эти природные объекты или продукты их простейшей
переработки отвары , экстракты и т. п . отличаются большой сложностью
состава, поскольку включают представителей самых разнообразных
классов органических соединений . Обнаружение , а тем более
количественное определение в этих сложных объектах физиологически
активных веществ являлось первоочередной задачей фармации, однако
решалась она из - за несовершенства и трудоемкости существовавших до
второй половины ХХ в. методов разделения крайне медленно. Решение
проблемы выделения индивидуальных природных соединений в качестве
лекарственных веществ из природных источников сырья и проблемы
контроля чистоты появившихся в конце Х IX начале XX в . синтетических
лекарственных препаратов также существенно сдерживалось отсутствием
универсальных методов разделения сложных смесей органических
соединений .
                                         50
под в ижны й раств оритель. Т аким образ ом, хроматог      раммуобрабаты в ают 3
раз а.
       Затем полоску бумаг     и в ы суш ив ают и проя в ля ют хроматог       рамму
раств ором нинг   ид рина (опры скив ают из пульв ериз атора). П роя в ленную
хроматограмму наг      рев ают 15-20 мин при 60 оС в суш ильном ш кафу.
Расположение з он ам инокислот по направ лению д в ижения раств орителя
(св ерху в низ ) след ующ ее: аспараг инов ая кислота, г    лутам инов ая кислота,
в алин.
       П осле раз в ития      хроматог раммы      в ы рез ают участки пя тен,
з анимаемы е      аминокислотами,       сбоку хроматограммы              в ы рез ают
контрольны е участки, не сод ержащ ие ам инокислот и рав ны е поплощ ад и
з онам опред еля ем ы х соед инений. В ы рез анны е участки бумаг   и из мельчают
ножницами и помещ ают в пробирки. В кажд ую пробирку д обав ля ют по
10 мл э люента, объем д ов од я т д о20 мл э тилов ы м спиртом и в стря хив ают.
Э люиров ание происход ит в рез ультате образ ов ания ком плексного
соед инения ам инокислот с Cu(II) оранжев ого цв ета, раств оримого в
э тилов ом спирте. П робирки с э люатами помещ ают в з атемненное местои
остав ля ютна1 ч., период ически перемеш ив аютих сод ержимое.
       К оличеств енны й анализ . О птическую плотность э кстрактов
из меря ют на фотоэ лектроколориметре при λ=530 нм. К онтрольны й
раств ор сод ержит в се необход имы е реактив ы , кроме аминокислот. Строя т
град уиров очны й г    рафик в коорд инатах оптическая плотность –
концентрация ам инокислот, моль/л. П о г       рафику наход я т концентрацию
аминокислотв анализ ируемом белков ом гид ролиз ате.

Х РО М АТО ГРАФ И ЧЕС КИ Е М ЕТО ДЫ АНА ЛИ ЗА В Ф АРМ АЦ И И И
    Х И М И КО -Ф АРМ А Ц ЕВТИ ЧЕС КО Й ПРО М Ы Ш ЛЕННО С ТИ

      Ф армация относится к числу наиболее д рев них естеств енны х наук,
объектами исслед ов ания которой уже в д алекие в ремена бы ли в
больш инств е случаев          объекты     растительного или жив отного
происхожд ения . Э ти природ ны е объекты или прод укты их простейш ей
переработки – отв ары , э кстракты и т.п. – отличаются больш ой сложностью
состав а, поскольку в ключают пред став ителей самы х раз нообраз ны х
классов орг    анических соед инений. О бнаружение, а тем более
количеств енное опред еление в э тих сложны х объектах физ иолог        ически
актив ны х в ещ еств я в ля лось перв оочеред ной з ад ачей фармации, од нако
реш алась она из -з а несов ерш енств а и труд оемкости сущ еств ов ав ш их д о
в торой полов ины     Х Х в . метод ов раз д еления крайне мед ленно. Реш ение
проблемы в ы д еления инд ив ид уальны х природ ны х соед инений в качеств е
лекарств енны х в ещ еств из природ ны х источников сы рья и проблем ы
контроля чистоты поя в ив ш ихся в конце Х IX – начале XX в . синтетических
лекарств енны х препаратов также сущ еств енносд ержив алось отсутств ием
унив ерсальны х метод ов раз д еления сложны х смесей орг           анических
соед инений.