Хроматографические методы в анализе лекарственных и токсичных веществ. Стоянова О.Ф - 49 стр.

                                          49
      11. 8-г ид роксихинолин: 0,1 гпрепарата раств оря ют в 100 мл смеси
          бутилов ог  оспиртас уксусной кислотой и в од ой (4:1:2).
      12. Раств оритель: смесь бутилов ого спирта с уксусной кислотой и
          в од ой в объемном соотнош ении4:1:5.
      13. П роя в итель: 200 мгнинг  ид ринараств оря ютв 100 млацетона.
      14. Э люент: 10 мл раств ора сульфата мед и с массов ой д олей 0,005 %
          в э тилов ом спирте раз бав ля ют 90 м л э тилов ог  оспирта, получают
                                                            -4
          раств ор сульфатамед и с массов ой д олей 5⋅10 %.
      15. А минокислоты :       аспараг инов ая ,  г лутам инов ая ,   в алин –
          станд артны е в од ны е раств оры с концентрацией 0,01 моль/л.
      16. А нализ ируемы й белков ы й гид ролиз ат.

        Вы полне ни е ра бот ы
        П од г
             отов ка хроматографической              бумаги.     Д ля    раз д еления
аминокислотприменя ютбумаг          у, пред в арительнообработанную раств ором
8-г ид роксихинолина (при э том уд аля ются след ов ы е количеств а катионов
металлов ).       Л исты      бумаг  и,      соотв етств ующ ие       по     раз меру
хроматографической камере, помещ ают в раств ор 8-г              ид роксихинолина.
Через 1-2 мин бумагу под суш ив ают в суш ильном ш кафу при 105 оС
(работаютв в ы тя жном ш кафу!), помещ аютв хроматог           рафическую камеру,
з акрепля ютод ин конец в кюв ете с под в ижны м раств орителем (э люентом).
        Раств оритель пропускают по бумаге св ерху в низ д о полного
уд аления темноокраш енны х г         ид роксихиноля тов в течение 36-48 ч.
П ромы тую бумаг     усуш атв в ы тя жном ш кафу.
        П остроение г   рад уиров очног  ог   рафика. Готов я т в од ны е раств оры
аминокислот с концентрацией 0,01 моль/л. Н ав ески ам инокислот,
соотв етств ующ ие 10 мл раств ора э той концентрации, состав ля ют д ля
аспарагинов ой кислоты 13,3, в алина11,7, г      лутам инов ой кислоты 14,7 мг     .
                                                                  -3
        М икропипеткой нанося тнабумагу(5, 10, 15, 20)⋅10 млстанд артны х
раств оров аминокислотпорция м и объемом по5⋅10-3 мл нарасстоя нии 5 см
от края с таким расчетом, чтобы кажд ая точки град уиров очног            ог  рафика
соотв етств ов ала 0,05; 0,10; 0,15 и 0,20 мгаминокислоты . Раств ор нанося т
на бумагутолькопосле в ы суш ив ания пред ы д ущ их капель. О птимальной
д ля в ы полнения работы я в ля ется сред а с рН 5-6, при э том устраня ется
иониз ация ам инокислот.
        Х роматографиров ание.         Раз д еление      ам инокислот      пров од я т
нисход я щ им метод ом. К онец бумаги, на котором нанесены капли
раств оров , помещ ают в кюв ету с под в ижны м раств орителем так, чтобы
пя тна исслед уемы х раств оров не пог      ружались в раств оритель. В качеств е
под в ижног  о раств орителя применя ют в ерхний слой смеси бутилов ого
спиртас уксусной кислотой и в од ой.
        Н ижний слой смеси пред наз начен д ля насы щ ения камеры . Д ля
раз в ития хроматог   раммы раств оритель пропускают на 2/3 д лины бумаги,
з атем хроматог    рамму в ы суш ив ают и в торично пропускают через нее