Техногенные системы и химическая безопасность. Улахович Н.А - 40 стр.

возможному для фермент-субстратной системы. Это позволило
разработать специфичный ферментативный метод определения
соединений антихолинэстеразного действия и создать на его основе
методику мониторинга окружающей среды на содержание ФОС.
    Для     решения     проблемы    повышения      чувствительности
ферментативного метода определения ФОС необходимо знать
структуру активного центра АХЭ и механизм влияния блокаторов
(ингибиторов) на скорость взаимодействия ацетилхолинэстеразы с
ФОС.
    Строение активного центра холинэстеразы было определено после
расшифровки аминокислотной последовательности (1986) и
трехмерной структуры центра (1991). Он расположен почти в центре
глобулы, в глубоком «ущелье». Непосредственно в разрыве эфирной
связи в молекуле ацетилхолина участвуют три аминокислотных
остатка: серин-203 (Ser), гистидин-447 (His), глутамин-334 (Glu),
располагающиеся на дне «ущелья». Отрицательный потенциал
увеличивается по мере углубления в «ущелье», так как формируется
своего рода электростатический «вакуумный насос», втягивающий
положительно заряженную молекулу ацетилхолина, благодаря
скольжению вдоль ароматических колец, выстилающих стенки ущелья
на глубину до 2 нм. Затем происходит ковалентное связывание
ацетилхолина по карбонильному углерода и гидроксильной группе
серина-447. Последущее высбождение холина приводит к
образованию ацетилированной холинэстеразы.
    Традиционная      точка     зрения    предполагала      наличие
локализованного      второго      участка     активного      центра,
координировавшего холиновую часть субстрата («анионная
поверхность»). Позднее было показано, что в молекуле фермента нет
различимой «анионной поверхности». Каталитическая триада
окружена     участками    полипептидной     цепи,   важными     для
каталитической активности фермента. К ним относятся участок
ацилирования («ацильный карман»), участок связывания холина
(«анионная яма») и участок связывания CH3N+ (рис.4.1).
    Одни ингибиторы холинэстеразы связываются с ее активным
центром, в то время как другие могут влиять на активность фермента,
ассоциируясь с его перифирическим участком, расположенным у
входа в активный центр.

                                 40