Практикум по биологической химии. Володина Г.Б. - 18 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

рованная
Растворимость
Опыт 2 Осаждение белков при нагревании
В 5 пробирок налейте по 1 см
3
раствора белка:
а) 1 пробирку нагрейте;
Аналитический эффект: помутнение раствора (опалесценция)
б) во 2 добавьте 1…2 капли 1 % раствора СН
3
СООН и пробирку нагрейте;
Аналитический эффект: помутнение раствора, а затем выпадение белого осадка.
(Белок теряет заряд и находится в изоэлектрическом состоянии)
в) в 3 добавьте 1…2 капли 10 % раствора СН
3
СООН и пробирку нагрейте;
Аналитический эффект: осадок не образуется.
(Белок изменяет заряд на положительный).
г) в 4 добавьте 1…2 капли 10 % раствора СН
3
СООН, каплю насыщенного раствора NaCl и пробир-
ку нагрейте;
Аналитический эффект: помутнение раствора, а затем выпадение белого осадка.
(Белок теряет заряд и находится в изоэлектрическом состоянии).
д) в 5 добавьте 1…2 капли 10 % раствора NaОН и пробирку нагрейте.
Аналитический эффект: осадок не образуется.
(Положительный заряд на белке усиливается).
Результаты опыта оформите в виде таблицы.
про-
бирки
Среда Изменения Выводы
1 Нейтральная
2 Слабокислая
(Раствор (1 %)
СН
3
СООН)
3 Кислая
(Раствор (10 %)
СН
3
СООН)
4 Кислая
(Раствор (10 %)
СН
3
СООН + + NaCl )
5 Щелочная
(10 % раствор NaOH)
Опыт 3 Осаждение белков химическими агентами.
3.1 При добавлении небольших количеств солей тяжелых металлов к раствору белка наблюдается
осаждение белков, связанное с образованием комплексных соединений. В избытке соли в силу адсорб-
ции металлов и появлению заряда белка осадок растворяется. Это явление называется адсорбционной
пептизацией.
а) к раствору белка добавьте 2…3 капли раствора нитрата серебра;
Аналитический эффект: выпадение осадка.
б) к 1 см
3
раствора белка добавьте 3 капли раствора сульфата меди. Затем добавьте еще 8 капель
раствора сульфата меди;
Аналитический эффект: образование осадка, который растворяется в избытке осадителя.
3.2 Минеральные кислоты вызывают дегидратацию белковых частиц и образуют комплексные со-
ли с белками. Осадок белка растворяется в избытке кислоты, за исключением азотной кислоты. Это по-
зволяет использовать азотную кислоту при клинических исследованиях для количественного определе-
ния белков.
а) наслаивают по стенке пробирки 10 капель азотной кислоты и 5 капель раствора белка (не пере-
мешивать. Осторожно, кислота!)
Аналитический эффект: на границе двух жидкостей образуется осадок в виде белого кольца.
При встряхивании и добавлении избытка азотной кислоты осадок не растворяется.