Практикум по биологической химии. Володина Г.Б. - 19 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ТГТУ | Тамбов

Составители: 

Рубрика: 

б) наслаивают по стенке пробирки 10 капель серной кислоты и 5 капель раствора белка (не пере-
мешивать. Осторожно, кислота!)
Аналитический эффект: на границе двух жидкостей образуется осадок в виде белого кольца.
При встряхивании и добавлении избытка серной кислоты осадок растворяется.
3.3 Как и неорганические, так и органические кислоты (сульфосалициловая, трихлоруксусная и
др.), вызывая дегидратацию и образуя комплексные соединения, денатурируют белки.
Сульфосалициловая кислота используется для обнаружения малых количеств белков в биологиче-
ских жидкостях. Она осаждает белки и пептиды.
Трихлоруксусная кислота (ТХУ) осаждает только белки и очень часто используется для отделения
белков от низкомолекулярных азотсодержащих соединений (аминокислот и пептидов.)
а) в пробирку помещают 6 капель раствора белка и добавляют 2 капли раствора сульфосалицило-
вой кислоты;
Аналитический эффект: выпадение осадка.
б) в пробирку помещают 6 капель раствора белка и добавляют 2 капли раствора трихлоруксусной
кислоты.
Аналитический эффект: выпадение осадка.
3.4 Фенол и мочевина образуют комплексные соли с белками, вызывая образование осадка.
а) к 1 см
3
раствора белка добавьте 3 капли водного раствора фенола;
Аналитический эффект: образование осадка.
б) к 1 см
3
раствора белка добавьте несколько кристаллов мочевины;
Аналитический эффект: образование осадка.
3.5 Танин, пикриновая кислота, растворы дииодида ртути в иодиде калия, фосфорновольфрамовая
и фосфорномолибденовая кислоты взаимодействуют с группой веществ, содержащих пиррольные, ин-
дольные, имидазольные гетероциклы, несущие положительный заряд в слабокислой среде. Наличие по-
добных группировок в белках приводит к образованию осадков, при этом растворы надо подкислить.
Протамины и гистоны осаждаются в нейтральной среде.
а) в пробирку поместите 5 капель раствора белка и прибавьте 1…2 капли раствора танина и 1…2
капли уксусной кислоты (1 %);
Аналитический эффект: образование серого осадка.
Опыт 4 Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка методом высаливания (3 % раствор
яичного белка в 1 % растворе NaCl).
4.1 К 1 мл яичного белка прилейте 9 мл дистиллированной воды.
Аналитический эффект: помутнение раствора (выпадение глобулинов).
4.2 а) к 1 мл яичного белка добавьте поваренную соль до насыщения (пока соль перестанет раство-
ряться).
Аналитический эффект: выпадение белого аморфного осадка глобулинов.
б) через 10 минут (время полного осаждения осадка) осадок отфильтруйте. Пробирку с фильтратом
прокипятите.
Аналитический эффект: выпадение яичного альбумина.
4.3 а) к 1 мл яичного белка добавьте равный объем насыщенного раствора сульфата аммония.
Аналитический эффект: образование осадка глобулинов.
б) Осадок отфильтруйте и к фильтрату добавьте порошок сульфата аммония до насыщения.
Аналитический эффект: образование пены (яичный альбумин).
Результаты опыта запишите в виде таблицы
Растворимость
Название
белка
Вода Раствор NaCl
Раствор (NH
4
)
2
SO
4
(насыщ.)
Глобулин
альбумин
Опыт 5 Биуретовая реакция.
К 1 см
3
раствора белка добавьте 1 см
3
раствора едкого натра, затем по каплям добавляйте раствор
сернокислой меди.
Аналитический эффект – раствор приобретает фиолетовый цвет.

Страницы