Практикум по биологической химии. Володина Г.Б. - 21 стр.

UptoLike

Составители: 

Рубрика: 

К 1 см
3
раствора белка прилейте 5 капель раствора сахарозы и осторожно добавьте 5 капель
концентрированной серной кислоты.
Аналитический эффект: на границе двух слоев жидкостей появляется вишнево-красное окрашива-
ние. Окраска появляется вследствие реакции триптофана с оксиметилфурфуролом, образующимся при
действии концентрированной серной кислоты на сахарозу.
Опыт 9 Реакция на серосодержащие аминокислоты.
3 см
3
раствора белка прокипятите с 6 см
3
раствора едкого натра (обратите внимание на выделение
аммика). К 1 см
3
раствора ацетата свинца прилейте раствор едкого натра до полного растворения вы-
павшего осадка. При этом образуется плюмбит натрия:
Pb(CH
3
COO)
2
+ 2NaOH Pb(OH)
2
+ 2CH
3
COONa;
Pb(OH)
2
+ 2NaOH Na
2
PbO
2
+ 2H
2
O;
плюмбит натрия
RSH + 2NaOH ROH + Na
2
S + H
2
O;
(S-содержащая аминокислота)
Na
2
S + Na
2
PbO
2
+ H
2
O PbS + 4NaOH.
Опыт 10 Реакция Вуазене.
В пробирку внесите 2 см
3
раствора яичного белка и 1 каплю раствора формальдегида. К полученной
смеси при охлаждении (лед) добавьте по каплям 6 см
3
серной кислоты (конц.). Через 10 мин внесите 10
капель раствора нитрита натрия.
Аналитический эффект: сине-фиолетовый цвет раствора.
Содержащийся в яичном белке триптофан, конденсируясь с формальдегидом, образует окрашенный
продукт конденсации бис-2-трипто-фанилметан (I), который окисляется до бис-2-
триптофанилкарбинола (II), образующего в кислой среде соль, окрашенную в фиолетовый цвет.
Опыт 11 Выделение казеина из молока.
В молоке содержится специфический белок казеин, содержащий фосфор. Содержание этого белка в
молоке составляет 80 % от общего числа белков. Казеин обладает кислотными свойствами и находится
в молоке в виде растворимой кальциевой соли. При подкислении белок выпадает в осадок в виде белых
рыхлых хлопьев, которые легко отделяются при фильтровании.
Ход работы
1. В стакан емкостью 50 мл приливают 3 мл молока, добавляют 7 мл дистиллированной воды и при
интенсивном перемешивании вносят по каплям 1 % раствор соляной кислоты (10…15 капель) до появ-
ления рыхлого осадка. Выдерживают смесь 5 мин, затем приливают 10 мл дистиллированной воды и
выдерживают еще 5 мин. Жидкость над осадком осторожно сливают и вновь приливают 10 мл дистил-
лированной воды. Через 5 мин фильтруют смесь через бумажный фильтр.
2. Небольшое количество осадка с фильтра переносят в колбу, приливают 6 мл 10 % раствора гид-
роксида натрия и кипятят на песчаной бане 1 час. Затем колбу охлаждают, приливают по каплям азот-
ную кислоту (20…30 капель) до кислой реакции. При этом образуется осадок высокомолекулярных
продуктов неполного гидролиза белка. Смесь фильтруют.
3. Фильтрат делят на 4 части: 1 – приливают раствор гидроксида натрия и 2–3 капли сульфата меди
(биуретовая реакция); 2 приливают 3–4 капли плюмбита натрия (см. опыт 9), 3 5 капель раствора