Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 120 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

119
В ферментном электроде фермент используют обычно в иммобилизо-
ванном виде. Для этого применяют два метода: химическую модифика-
цию молекул фермента путем введения групп, обеспечивающих нераство-
римость, и физическое включение фермента в инертный носитель (крах-
мал, ПААГ) (рис. 3.4). Ферментный электрод используют как обычный
ионоселективный электрод. Потенциометрические датчики (электроды
для определения мочевины, пенициллина
, аминокислот) непосредственно
подключают к цифровому вольтметру; строят график зависимости потен-
циала (мВ) от концентрации определяемого вещества в полулогарифмиче-
ских координатах.
При использовании амперметрических электродов (платинового или
кислородного) для определения глюкозы, спирта применяют полярограф.
При этом строят график зависимости силы тока (мкА) от концентрации
вещества в линейных координатах. Вместо полярографа можно
использо-
вать устройство (адаптор), которое подает потенциал на амперометриче-
ский датчик (в случае определения глюкозы или спирта), преобразуя ток в
разность потенциалов, регистрируемую вольтметром. Вместе с фермент-
ным электродом используют электрод сравнения (например, каломель-
ный). Последний может быть частью комбинированного ферментного
Таблица 3.7
Типичные ферментные электроды и их параметры (по Дж. Вудворду, 1988)
Определяемое
вещество
Фермент Датчик
Стабиль-
ность
Время
реакции
Чувствитель-
ность, М/л
Мочевина Уреаза Катионный
Газовый (NH
3
)
3 недели
1 мес.
30–60 с
2–4 мин.
10
–2
– 5⋅10
–5
до 5⋅10
–4
Глюкоза Глюкозо-
оксидаза
рН-электрод
Газовый (О
2
)
1 неделя
3 недели
5–10 мин.
2–5 мин.
10
–1
– 10
–3
2⋅10
–4
L-амино-
кислоты
Оксидаза
L-аминокислот
Pt(H
2
O
2
) 4–6 мес. 12 с 10
–3
– 10
–5
Спирты Алкоголь-
оксидаза
Pt(H
2
O
2
) 1 неделя 12 с 0.5 – 100 мг/ %
Пенициллин Пенициллиназа рН-электрод 2 недели 0.5–2 мин. 10
–2
– 10
–4
Мочевая
кислота
Уратоксидаза Pt(H
2
O
2
) 4 мес. 30 с 10
–2
– 10
–4
Нитрат Нитрат-
редуктаза
NH
4+
2–3 мин. 10
–2
– 10
–4
Нитрит Нитрит-
редуктаза
Газовый (NH
3
) 3–4 мес. 2–3 мин.
5⋅10
–2 –
5⋅10
–4
Сульфат Акрил-
сульфатаза
Pt 1 мес. 1 мин. 10
–1
– 10
–4
Электродный
датчик
Электродный
датчик
Найлоновая
сеточка
Диализная
мембрана
4321
А
Б
С
лой геля,
содержащего
фермент
Резиновое
кольцо
Резиновое кольцо
Фермент
Рис. 3.4. Изготовление ферментных электродов (по Дж. Вудворду, 1988).
А – с использованием физически включенных ферментов, Б – химически связанных ферментов.

Страницы