Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 65 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

64
ние, так как в результате внесения в среду готового интермедиата снима-
ются проблемы, связанные с наличием генетического контроля в системе
синтеза аминокислот.
При двухступенчатом способе получения глутаминовой кислоты из
α-
кетоглутаровой, играющей роль предшественника, необходим источник
данного предшественника и ферментная система, катализирующая пре-
вращение кетоглутарата в целевую аминокислоту. Кетоглутарат получают
микробиологическим синтезом на основе бактерий (Pseudomonas,
Escherichia) или дрожжей (Candida) – I ступень. На II ступени можно по-
лучить L-глутаминовую кислоту в реакции восстановительного аминиро-
вания с помощью культуры Pseudomonas, имеющей сильную глутаматде-
гидрогеназу:
α-кетоглутаровая кислота + NН
4
+ НАДН →
→ L-глутаминовая кислота + Н
2
О + НАД
+
.
L-глутаминговая кислота также может быть получена из кетоглутарата
через переаминирование последней с участием трансамидазы:
α-кетоглутаровая кислота + аминокислота →
→ L-глутаминовая кислота +α-кетокислота;
II ступень по данной схеме может быть реализована культурой E.
coli, в качестве донора аминогрупп могут выступать аланин или аспара-
гиновая кислота.
Комбинированный, принципиально новый способ получения L-лизина
в 1973 г. был предложен японской фирмой «Тойо Рейон» («Торей»). Ко-
нечный продукт, получаемый по данной технологии, отличается высокой
концентрацией и чистотой. На первой
стадии циклогексан в результате
химических реакций превращается в циклический ангидрид лизина (D, L-
α-амино-ε-капролактам). На второй стадии осуществляют разделение оп-
тических изомеров с помощью ферментов; происходящий при этом асим-
метрический гидролиз с участием гидролазы аминокапролактама приво-
дит к образованию L-лизина. Гидролазу L-
α-амино-ε-капролактама синте-
зируют дрожжи (Candida, Trichospora, Cryptococcus), фермент стимулиру-
ется ионами марганца, магния и цинка. Источником рацемазы аминока-
пролактама могут служить бактерии (Flavobacterium, Achromobacter). Оба
эти фермента, обладающие рацемазной и гидролазной активностями, в
виде определенного количества биомассы вводят на II ступени в водный
раствор предшественника – DL-аминокапролактама. В ходе ферментатив-
ных реакций из предшественника образуется L-лизин, чистота
препарата –
выше 99 %. Помимо микробной биомассы, источником превращений DL-
аминокапролактама в лизин могут служить изолированные иммобилизо-
ванные ферменты. Раствор предшественника пропускают через колонку,
содержащую оба иммобилизованных фермента: один из них (гидролаза)
гидролизует амидную связь в L-аминокапролактаме, не затрагивая D-

Страницы