Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 82 стр.

шильный шкаф; фарфоровые пестик и ступка; центрифужные пробирки; центрифуга;
мерные цилиндры; стаканы; ФЭК.
         Ход работы:
         1. Навеску растертого исследуемого материала (1-20 г) залива-
ют 100 мл 1н раствором соляной кислоты и подвергают гидролизу в те-
чение часа на кипящей водяной бане. Солянокислую вытяжку охлажда-
ют, затем нейтрализуют 20%-ным раствором едкого натра до рН=6,5
(под контролем универсального индикатора), после чего к, ней добав-
ляют 100 мл 95-96%-ного этилового спирта и хорошо перемешивают.
         2. Выпавший осадок отфильтровывают, к прозрачному фильтрату
прибавляют 2 г асканита и взбалтывают с адсорбентом в течение 3 мин, ас-
канит отфильтровывают. Фильтр с асканитом переносят в ту же колбу, в
которой обрабатывали вытяжку адсорбентом, добавляют 25 мл 1н раствора
едкого натра и встряхивают колбу в течение 3 мин для элюирования нико-
тиновой кислоты.
         Взвесь переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют.
Объем центрифугата измеряют тем же цилиндром, потом его без потерь
переливают в стакан и прибавляют раствор сернокислого цинка до рН=6,5
(по универсальному индикатору).
         3. Образовавшуюся в стакане густую массу фильтруют. Филь-
трат нагревают на электрической плитке и к нему по каплям добавляют
нормальный раствор марганцовокислого калия до получения прозрач-
ного раствора (окисление посторонних примесей); расходуют обычно 4-
6 капель раствора.
         4. После охлаждения содержимое колбы центрифугируют. Цен-
трифугат обрабатывают кристаллическим К3РО4 (индикатор - спиртовой
раствор фенолфталеина), после чего добавляют раствор соляной кисло-
ты (1:1) до рН=6,5 и фильтруют.
         5. Затем 5 мл испытуемой вытяжки и 5 мл стандартного раство-
ра никотиновой кислоты прогревают 5 мин на кипящей водяной бане (в
отдельных стаканчиках), затем к ним одновременно прибавляют по 2 мл
роданбромидного раствора и 7 мл спиртового раствора анилина. Смеси
оставляют на 30-40 мин, потом фильтруют через бумажные фильтры и
колориметрируют на ФЭКе ( =440 нм). В качестве контроля применяют
водный раствор этилового спирта (1:1).
         10. Содержание никотиновой кислоты рассчитывают по форму-
ле: Х    25  v1 n1 10 100
                          ,
         Н v 5 n2 1000
где Х – содержание никотиновой кислоты, мг/100 г растительного мате-
риала;


82