Биохимия белков. Яковлева М.Н - 24 стр.

    Готовят семь рабочих стандартных растворов белка
разведением основного стандартного раствора (содержит 4 мг
белка в 1 мл) дистиллированной водой, как указано в таблице:

     №        Стандартный       Н2О,     Содержание      Е
    проб       раствор, мл       мл        белка в
                                          пробе, мл
     1             0,25         1,75         1,0
     2             0,50         1,50         2,0
     3             0,75         1,25         3,0
     4             1,00         1,00         4,0
     5             1,25         0,75         5,0
     6             1,50         0,50         6,0
     7             1,75         0,25         7,0
  Контроль           -          2,00          -          -

    Для приготовления контрольной пробы в пробирку наливают
2 мл дистиллированной воды. Во все рабочие стандартные
растворы и контроль добавляют по 2,5 мл биуретового реактива,
перемешивают и оставляют при комнатной температуре на
30 минут для развития окраски. Окрашенные стандартные
растворы колориметрируют на КФК-2 против контроля в кюветах
на 5 мл с зеленым светофильтром (длина волны 540 нм).
Полученные значения оптической плотности используют для
построения калибровочной кривой.
    2. Количественное определение белка в сыворотке крови
    Исследуемую сыворотку крови разбавляют дистиллированной
водой в 40 раз (1мл сыворотки смешивают с 39 мл Н2О). К 2 мл
разбавленной сыворотки добавляют 2,5 мл биуретового реактива и
после перемешивания оставляют при комнатной температуре на 30
минут, а затем колориметрируют.
    Контрольная проба вместо сыворотки содержит 2 мл
дистиллированной воды. Измерение оптической плотности
производится так же, как при построении калибровочной кривой.

                      Оформление работы
   1.   Записать величины оптической плотности стандартных
        растворов в виде таблицы:

   24