Биохимия белков. Яковлева М.Н - 29 стр.

    1. 0,5 г селезенки (или зобной железы) растирают в
фарфоровой ступке со 100 мг стеклянного порошка, постепенно
добавляя небольшими порциями 15 мл 5% раствора хлорида
натрия. Затем содержимое ступки фильтруют через двойной слой
марли.
     В химический стакан вместимостью 150 мл наливают
60-90 мл дистиллированной воды и медленно, при непрерывном
помешивании стеклянной палочкой вливают в воду полученный
фильтрат. Нерастворимые в воде ДНП выпадают в осадок в виде
нитей, наматывающихся на палочку. Выделенные ДНП осторожно
вынимают вместе с палочкой, переносят в чистую пробирку и
растворяют в 1-2 мл 0,4% раствора гидроксида натрия.
       ПРИМЕЧАНИЕ. Если нити ДНП не образовались, а
выделился хлопьевидный осадок, то ему дают отстояться, после
чего большую часть жидкости из стакана осторожно сливают,
оставшуюся часть центрифугируют.
    2. С полученным раствором ДНП делают качественные
реакции на белок и ДНП:
    а) Биуретовая реакция на белок.
    К 10 каплям ДНП добавляют 10 капель 10% раствора
гидроксида натрия и 1 каплю 1% раствора сульфата меди. Раствор
окрашивается в сине-фиолетовый цвет.
    б) Реакция с дифениламином на дезоксирибозу.
    К 10 каплям раствора ДНП добавляют 20 капель
дифениламинового реактива (дифениламин, растворенный в
ледяной уксусной кислоте с добавлением концентрированной
серной кислоты), перемешивают и ставят в кипящую водяную
баню на 5-10 минут. Жидкость постепенно приобретает синее
окрашивание, обусловленное реакцией дифениламина с
дезоксирибозой.
                       Оформление работы
    Записать принцип использованного метода выделения ДНП и
результаты качественных реакций.

                   Техника безопасности
    Будьте внимательны при работе с 10% щелочью натрия и
дифениламиновым реактивом.


                                                          29