Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 62 стр.

бумагу,     которая   засасывает   раствор     под     покровное   стекло.   При
микроскопировании препарата видны клетки клостридиев с потемневшим
содержимым. Спора в клетке остается при этом неокрашенной и хорошо
различима на темном фоне.
     Обнаружить клубеньковые бактерии в почве довольно трудно
вследствие отсутствия элективных сред. Выявляют их в почве при помощи
растений.   Опыт ставят     следующим       образом.   В небольшие     колбочки
Эрленмейера разливают невысоким (4 см высоты) слоем питательную среду
следующего состава (г/л): К2НР04 - 1,0; MgS04. . 7H20 - 1,0; СаСОз - 0,5; FeS04,
НзРОз, MnS04 - следы; агар-агар - 0,1. Колбы стерилизуют при 121° 20 мин.
После застывания агара на поверхность среды раскладывают предварительно
простерилизованные семена клевера. Стерилизацию семян проводят 1%-ным
раствором сулемы в спирте или 1%-ной бромной водой 5 мин. Перед этим
семена обрабатывают мылом или другим поверхностно-активным веществом
для обеспечения полной смачиваемости поверхности. Промытые семена
проверяют на стерильность посевом на МПА и бобовый агар.
     Вместе с семенами в колбочки добавляют 1 мл почвенной суспензии
(разведение 1 : 10). Контролем служит колба, куда добавляется 1 мл суспензии
почвы, взятой из-под клевера. Сосуды обертывают снаружи плотной бумагой,
так чтобы она закрывала агар и семена, предохраняя бактерии от действия
света. Растения выращивают в вегетационном домике или в лаборатории при
естественном или искусственном освещении. По мере развития растений
проводят наблюдения за образованием клубеньков в исследуемой почве,
принимая за 100% количество растений, образующих клубеньки в контрольной
колбе.
     Для выделения культур клубеньковых бактерий корни с клубеньками
тщательно отмывают от почвенных частиц, клубенек отрезают, промывают в
стерильной воде, трижды сменяя ее, помещают в раствор сулемы (1 : 1000) в
чашке Петри и выдерживают 2—3 мин. Затем переносят клубенек в чашку
Петри со стерильной водопроводной водой, промывают в течение 5 мин, вы-

                                       61