Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 64 стр.

UptoLike

Рубрика: 

63
CoS0
4
- 0,001 г; дистиллированная вода).
Через 810 недель инкубирования кусочков клубеньков в среде при 28°
отбирают пробирки, где рост посторонних бактерий и грибов отсутствует. В
таких пробирках дольки клубеньков опушены мицелием актиномицетов,
различимым визуально. Кусочки клубеньков с мицелием рассевают на чашки
диаметром 50 мм вглубь полутвердой (0,8%-ного агара Дифко) МСК. Чашки
заклеивают липкой лентой для ограничения поступления кислорода и
инкубируют при 28° в течение 24 недель. Затем проводят микроскопический
контроль колоний, появившихся в толще агара и вокруг кусочков клубенька.
Колонии небольших размеров диаметром 12 мм, имеющие тонкий
септированный нераспадающийся мицелий с терминальными и
интеркалярными спорангиями и везикулами, отсевают на чашки с полутвердой
МСК и в пробирки с жидкой МСК для дальнейшего культивирования.
Для выявления аммонифицирующих бактерий в почве пользуются
методом посева из почвенных суспензий на МПА. Накопительную культуру
аммонификаторов можно получить, засевая комочками почвы пептонную воду
или мясопептонный бульон в пробирках или колбочках. Пробирки закрывают
ватными пробками и под них подвешивают влажную красную лакмусовую
бумажку для обнаружения аммиака. Об образовании сероводорода судят по
реакции с уксуснокислым свинцом, раствором которого пропитывают полоски
фильтровальной бумаги и помещают их под пробки. Сверху пробки надевают
резиновый колпачок для затруднения выхода газообразных продуктов. После
23 дней инкубации при 25—30° лакмусовая бумажка синеет от выделяю-
щегося аммиака, а бумажка с уксуснокислым свинцом темнеет. Просматривая
под микроскопом препараты, приготовленные из накопительной культуры,
можно наблюдать крупные клетки споровых бацилл.
Для обнаружения нитрификаторов в почве пользуются обычно
накопительными культурами на элективной среде.
Для выделения и учета аммонийокисляющих бактерий используют
среду Сориано и Уокера (г/л дистиллированной воды): (NH
4
)
2
SO
4
- 0,5; КН
2
Р0
4
CoS04 - 0,001 г; дистиллированная вода).
      Через 8—10 недель инкубирования кусочков клубеньков в среде при 28°
отбирают пробирки, где рост посторонних бактерий и грибов отсутствует. В
таких пробирках дольки клубеньков опушены мицелием актиномицетов,
различимым визуально. Кусочки клубеньков с мицелием рассевают на чашки
диаметром 50 мм вглубь полутвердой (0,8%-ного агара Дифко) МСК. Чашки
заклеивают липкой лентой для ограничения поступления кислорода и
инкубируют при 28° в течение 2—4 недель. Затем проводят микроскопический
контроль колоний, появившихся в толще агара и вокруг кусочков клубенька.
Колонии небольших размеров диаметром 1—2 мм, имеющие тонкий
септированный      нераспадающийся         мицелий   с   терминальными   и
интеркалярными спорангиями и везикулами, отсевают на чашки с полутвердой
МСК и в пробирки с жидкой МСК для дальнейшего культивирования.
      Для выявления аммонифицирующих бактерий в почве пользуются
методом посева из почвенных суспензий на МПА. Накопительную культуру
аммонификаторов можно получить, засевая комочками почвы пептонную воду
или мясопептонный бульон в пробирках или колбочках. Пробирки закрывают
ватными пробками и под них подвешивают влажную красную лакмусовую
бумажку для обнаружения аммиака. Об образовании сероводорода судят по
реакции с уксуснокислым свинцом, раствором которого пропитывают полоски
фильтровальной бумаги и помещают их под пробки. Сверху пробки надевают
резиновый колпачок для затруднения выхода газообразных продуктов. После
2—3 дней инкубации при 25—30° лакмусовая бумажка синеет от выделяю-
щегося аммиака, а бумажка с уксуснокислым свинцом темнеет. Просматривая
под микроскопом препараты, приготовленные из накопительной культуры,
можно наблюдать крупные клетки споровых бацилл.
      Для обнаружения нитрификаторов в почве пользуются обычно
накопительными культурами на элективной среде.
      Для выделения и учета аммонийокисляющих бактерий используют
среду Сориано и Уокера (г/л дистиллированной воды): (NH4)2SO4 - 0,5; КН2Р04

                                      63