Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 65 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

МГУ | Москва

Составители: 

Рубрика: 

64
- 0,2; CaCl
2
.
H
2
O - 0,04; MgS0
4
.
7Н
2
О - 0,04; железо лимоннокислое - 0,0005; 1
мл 0,05%-ного раствора фенолового красного; рН 7,5—7,8 (устанавливают 5-
ным раствором NaHCO
3
). В среду добавляют следующие микроэлементы (мг/л
дистиллированной воды): трилон Б - 500; FeS0
4
.
7H
2
O - 200; ZnS0
4
.
7H
2
O - 10;
МпС1
2
.
4Н
2
О - 3; Н
з
В0
4
- 30; СаСl
2
.
6Н
2
О - 20; CuCl
2
.
2H
2
0 - 1; NaCl
2
.
6H
2
O - 2;
Na
2
MoO
4
.
2H
2
O - 3.
Наличие индикатора, изменяющего окраску при подкислении на желтую,
позволяет судить о развитии культур. Образование нитритов проверяется
качественно с реактивом Грисса (красное окрашивание).
Нитритокисляющие бактерии выделяют на среде Ватсона и Уотербери
(г): NaNO
2
- 0,07; MgS0
4
.
H
2
O - 0,1; CaCl
2
.
6H
2
O - 0,006; K
2
HP0
4
- 0,02;
водопроводная вода - 700 мл; дистиллированная вода - 300 мл; рН 7,5.
Об использовании нитрита судят по реакции с реактивом Грисса. Среды
заражают почвой (1% по объему). Накопительные культуры инкубируются в
темноте при 25—30° в течение 3—4 недель.
Для обнаружения нитрифицирующих бактерий могут быть
использованы и плотные питательные среды — пластинки кремнекислого геля.
Готовят их следующим образом. К соляной кислоте плотностью 1,1 приливают
при помешивании равный объем жидкого калийного или натриевого стекла
плотностью 1,05—1,06 и слегка подогревают. Начинающий коагулировать золь
быстро разливают по чашкам Петри и дают ему застыть. Затем чашки
помещают в сосуд, до дна которого проходит каучуковая трубка, соединенная с
водопроводом. Кремневые пластинки промывают водопроводной водой до тех
пор, пока гель не перестает давать реакцию на С1 (проба с AgNO
3
). Тогда
чашки вынимают, промывают 2—3 раза дистиллированной водой и
пропитывают средой Виноградского, состоящей из 2-х растворов: 1) К
2
НР0
4
-
0,5 г; MgS0
4
.
7H
2
0 - 0,3 г; NaCI - 0,3 г; FeSO
4
- 0,02 г; MgCO
3
- 0,02 г;
дистиллированная вода - 0,2 л; 2) (NH
4
)
2
S0
4
- 10 г; дистиллированная вода - 0,2
л. Берут 2 мл первого и 1 мл второго растворов, чашки подсушивают. Сте-
рилизуют чашки при 112° 15 мин. После этого на поверхность чашек в 
- 0,2; CaCl2 . H2O - 0,04; MgS04 . 7Н2О - 0,04; железо лимоннокислое - 0,0005; 1
мл 0,05%-ного раствора фенолового красного; рН 7,5—7,8 (устанавливают 5-
ным раствором NaHCO3). В среду добавляют следующие микроэлементы (мг/л
дистиллированной воды): трилон Б - 500; FeS04 . 7H2O - 200; ZnS04 . 7H2O - 10;
МпС12 . 4Н2О - 3; НзВ04 - 30; СаСl2 . 6Н2О - 20; CuCl2 . 2H20 - 1; NaCl2 . 6H2O - 2;
Na2MoO4 . 2H2O - 3.
      Наличие индикатора, изменяющего окраску при подкислении на желтую,
позволяет судить о развитии культур. Образование нитритов проверяется
качественно с реактивом Грисса (красное окрашивание).
      Нитритокисляющие бактерии выделяют на среде Ватсона и Уотербери
                             .                       .
(г): NaNO2 - 0,07; MgS04         H2O - 0,1; CaCl2        6H2O - 0,006; K2HP04 - 0,02;
водопроводная вода - 700 мл; дистиллированная вода - 300 мл; рН 7,5.
     Об использовании нитрита судят по реакции с реактивом Грисса. Среды
заражают почвой (1% по объему). Накопительные культуры инкубируются в
темноте при 25—30° в течение 3—4 недель.
        Для   обнаружения        нитрифицирующих             бактерий   могут   быть
использованы и плотные питательные среды — пластинки кремнекислого геля.
Готовят их следующим образом. К соляной кислоте плотностью 1,1 приливают
при помешивании равный объем жидкого калийного или натриевого стекла
плотностью 1,05—1,06 и слегка подогревают. Начинающий коагулировать золь
быстро разливают по чашкам Петри и дают ему застыть. Затем чашки
помещают в сосуд, до дна которого проходит каучуковая трубка, соединенная с
водопроводом. Кремневые пластинки промывают водопроводной водой до тех
пор, пока гель не перестает давать реакцию на С1 (проба с AgNO3). Тогда
чашки    вынимают,    промывают       2—3     раза       дистиллированной   водой   и
пропитывают средой Виноградского, состоящей из 2-х растворов: 1) К2НР04 -
0,5 г; MgS04 . 7H20 - 0,3 г; NaCI - 0,3 г; FeSO4 - 0,02 г; MgCO3 - 0,02 г;
дистиллированная вода - 0,2 л; 2) (NH4)2S04 - 10 г; дистиллированная вода - 0,2
л. Берут 2 мл первого и 1 мл второго растворов, чашки подсушивают. Сте-
рилизуют чашки при 112° 15 мин. После этого на поверхность чашек в

                                         64

Страницы