Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 68 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

МГУ | Москва

Составители: 

Рубрика: 

67
предотвращения осаждения солей MgS0
4
.
7H
2
0 и СаС1
2
.
2Н
2
0 они автоклавиро-
вались отдельно. Яблочная кислота перед добавлением в среду
нейтрализовалась NaOH до рН 6,8. В этих условиях ацетиленовым методом
регистрировался процесс фиксации молекулярного азота. В случае если к
основной среде добавляли КNОз, процесс азотфиксации прекращался, культура
A. brasilense начинала восстанавливать нитрат. Количество выделяемого N
2
O
регистрировали на газовом хроматографе.
Обнаружение микроорганизмов, участвующих в превращениях
фосфора, серы, железа и марганца
Для выделения из почвы микроорганизмов, обладающих
способностью растворять фосфаты железа и алюминия используют
следующий метод. Фосфаты железа и алюминия осаждают следующим
образом. Простерилизованные через фильтр Зейца растворы Na
3
P0
4
и FеС1з
(для получения FePО
4
) или А1С1з (для получения А1Р0
4
) сливают и после
осаждения асептически вносят в расплавленную глюкозо-аспарагиновую среду
(г/л): глюкоза - 10,0; аспарагин - 0,5; К
2
НР0
4
- 0,5; агар - 20,0. Используют
следующие навески (мг): FeCl
3
.
бН
2
О - 390; Na
3
Р0
4
.
12Н
2
О - 570; АlClз
.
бН
2
О -
360. Среду разливают в чашки Петри и засевают почвенной суспензией (раз-
ведения 10
4
—10
6
). Инкубируют при 28° 3—10 суток. Вокруг колоний бактерий,
актиномицетов, грибов, растворяющих фосфаты железа и алюминия,
образуются зоны просветления.
Для выделения из почвы микроорганизмов, растворяющих соли
фитиновой кислоты (фитаты — наиболее распространенные органофосфаты
почвы), используют метод Муромцева. Фитаты железа получают следующим
образом: 50 г фитина растворяют в 500 мл 2%-ной НС1 и осаждают фитат
железа добавлением концентрированного водного раствора РеС1з (выпадает
белый осадок фитата железа). Осадок отфильтровывают, промывают 2%-ной
НС1 до тех пор, пока фильтрат не перестает мутнеть при добавлении NaOH до
рН 6. Фитат железа вносят (0,1% по сухому весу) в глюкозо-аспарагиновую 
предотвращения осаждения солей MgS04 . 7H20 и СаС12 . 2Н20 они автоклавиро-
вались   отдельно.   Яблочная     кислота    перед     добавлением   в   среду
нейтрализовалась NaOH до рН 6,8. В этих условиях ацетиленовым методом
регистрировался процесс фиксации молекулярного азота. В случае если к
основной среде добавляли КNОз, процесс азотфиксации прекращался, культура
A. brasilense начинала восстанавливать нитрат. Количество выделяемого N2O
регистрировали на газовом хроматографе.

      Обнаружение микроорганизмов, участвующих в превращениях
                     фосфора, серы, железа и марганца

     Для     выделения     из    почвы      микроорганизмов,     обладающих
способностью растворять фосфаты железа и алюминия используют
следующий метод. Фосфаты железа и алюминия осаждают следующим
образом. Простерилизованные через фильтр Зейца растворы Na3P04 и FеС1з
(для получения FePО4) или А1С1з (для получения А1Р04) сливают и после
осаждения асептически вносят в расплавленную глюкозо-аспарагиновую среду
(г/л): глюкоза - 10,0; аспарагин - 0,5; К2НР04- 0,5; агар - 20,0. Используют
следующие навески (мг): FeCl3 . бН2О - 390; Na3Р04 .12Н2О - 570; АlClз . бН2О -
360. Среду разливают в чашки Петри и засевают почвенной суспензией (раз-
ведения 104—106). Инкубируют при 28° 3—10 суток. Вокруг колоний бактерий,
актиномицетов,   грибов,   растворяющих      фосфаты    железа   и   алюминия,
образуются зоны просветления.
     Для выделения из почвы микроорганизмов, растворяющих соли
фитиновой кислоты (фитаты — наиболее распространенные органофосфаты
почвы), используют метод Муромцева. Фитаты железа получают следующим
образом: 50 г фитина растворяют в 500 мл 2%-ной НС1 и осаждают фитат
железа добавлением концентрированного водного раствора РеС1з (выпадает
белый осадок фитата железа). Осадок отфильтровывают, промывают 2%-ной
НС1 до тех пор, пока фильтрат не перестает мутнеть при добавлении NaOH до
рН 6. Фитат железа вносят (0,1% по сухому весу) в глюкозо-аспарагиновую

                                      67

Страницы