Практикум по биологии почв. Зенова Г.М - 69 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

МГУ | Москва

Составители: 

Рубрика: 

68
среду. Перед внесением удаляют избыток соляной кислоты, добавляют агар и
стерилизуют при 115° 30 мин. Вокруг колоний бактерий, актиномицетов,
грибов, растворяющих фитаты железа, образуются зоны просветления.
Накопительную культуру фотосинтезирующих серобактерий можно
получить, используя следующую среду (г): КН
2
Р0
4
- 1; NH
4
C1 - 0,5; MgS0
4
.
7H20 - 0,4; СаСl
2
.
Н
2
О - 0,05; раствор микроэлементов - 1 мл; дистиллированная
вода - 950 мл. Раствор микроэлементов (г/л дистиллированной воды): ЭДТА -
5,2; FeCl
2
.
4H
2
0 - 1,5; ZnCl
2
- 0,07; MnCl
2
.
H
2
O - 0,1; Н
3
ВОз - 0,062; CoCl
2
.
6H
2
0
- 0,19; CuCl
2
.
H
2
O - 0,017; NiCl
2
.
6H
2
0 - 0,024; Nа
2
Мо0
4
.
2Н
2
О - 0,036. В
стерильную среду асептически добавляют раствор микроэлементов, 1 мл
витамина В
12
(2 мг В
12
на 100 мл дистиллированной воды) и 40 мл К
2
НСОз (5%-
ный). Растворы витаминов и NaHCO3 стрелиризуют предварительно
фильтрованием.
В среду добавляют 5%-ный раствор Nа
2
S
.
9Н
2
О в дистиллированной воде
(16 мл — для пурпурных и 12 мл для зеленых серобактерий). Раствор
стерилизуют автоклавированием; рН среды для зеленых серобактерий 6,8, для
пурпурных — 8,3 (доводится Н
2
S0
4
или N
2
CO
3
(2 моль/л соответственно).
Среду разливают высоким слоем в пробирки и заражают почвой или
илом. Инкубацию производят при искусственном или естественном освещении.
Для выделения и культивирования тионовых бактерий пользуются
следующими средами (г/л):
1) (NH
4
)
2
S0
4
- 0,2; MgS0
.
7H
2
0 - 0,1; FeS0
4
- 0,01; CaCI
2
- 0,25; КН
2
Р0
4
-
3,0; порошкообразная сера - 10 г (серу стерилизуют отдельно и добавляют в
среду перед посевом);
2) Na
2
S
2
0
3
.
5H
2
0 - 5,0; (NH
4
)
2
S0
4
- 0,4; K
2
HP0
4
- 4,0; КН
2
Р0
4
- 1,5; CaCl
2
-
0,25; MgS0
4
.
7H
2
0 - 0,5; FeS0
4
- 0,01; рН 7.
Инкубацию проводят в термостате в течение 1—2 недель. О развитии
тионовых бактерий судят по растворению серы, образованию пленки или
помутнению среды, падению рН раствора и присутствию в нем сульфатов.
Сульфаты обнаруживаются при помощи 5%-ного раствора BaCl
2
в 2н. НС1 
среду. Перед внесением удаляют избыток соляной кислоты, добавляют агар и
стерилизуют при 115° 30 мин. Вокруг колоний бактерий, актиномицетов,
грибов, растворяющих фитаты железа, образуются зоны просветления.
        Накопительную культуру фотосинтезирующих серобактерий можно
                                                                                       .
получить, используя следующую среду (г): КН2Р04 - 1; NH4C1 - 0,5; MgS04
7H20 - 0,4; СаСl2. Н2О - 0,05; раствор микроэлементов - 1 мл; дистиллированная
вода - 950 мл. Раствор микроэлементов (г/л дистиллированной воды): ЭДТА -
5,2; FeCl2 . 4H20 - 1,5; ZnCl2 - 0,07; MnCl2 . H2O - 0,1; Н3ВОз - 0,062; CoCl2 . 6H20
                .                        .                           .
- 0,19; CuCl2       H2O - 0,017; NiCl2       6H20 - 0,024; Nа2Мо04       2Н2О - 0,036. В
стерильную среду асептически добавляют раствор микроэлементов, 1 мл
витамина В12 (2 мг В12 на 100 мл дистиллированной воды) и 40 мл К2НСОз (5%-
ный).    Растворы      витаминов   и     NaHCO3       стрелиризуют       предварительно
фильтрованием.
        В среду добавляют 5%-ный раствор Nа2S . 9Н2О в дистиллированной воде
(16 мл — для пурпурных и 12 мл для зеленых серобактерий). Раствор
стерилизуют автоклавированием; рН среды для зеленых серобактерий 6,8, для
пурпурных — 8,3 (доводится Н2S04 или N2CO3 (2 моль/л соответственно).
        Среду разливают высоким слоем в пробирки и заражают почвой или
илом. Инкубацию производят при искусственном или естественном освещении.
        Для выделения и культивирования тионовых бактерий пользуются
следующими средами (г/л):
        1) (NH4)2S04 - 0,2; MgS0 . 7H20 - 0,1; FeS04 - 0,01; CaCI2 - 0,25; КН2Р04 -
3,0; порошкообразная сера - 10 г (серу стерилизуют отдельно и добавляют в
среду перед посевом);
        2) Na2S203 . 5H20 - 5,0; (NH4)2S04 - 0,4; K2HP04 - 4,0; КН2Р04 - 1,5; CaCl2 -
0,25; MgS04 . 7H20 - 0,5; FeS04 - 0,01; рН 7.
        Инкубацию проводят в термостате в течение 1—2 недель. О развитии
тионовых бактерий судят по растворению серы, образованию пленки или
помутнению среды, падению рН раствора и присутствию в нем сульфатов.
Сульфаты обнаруживаются при помощи 5%-ного раствора BaCl2 в 2н. НС1

                                              68

Страницы