Основы производства безопасной и экологически чистой животноводческой продукции. Александров Ю.А. - 222 стр.

туры. Таким образом, методы генной инженерии были разработа-
ны в 60-70-х годах прошлого столетия. Они включают следующие
основные этапы:
   1) получение генетического материала (выделение генов или
их синтез);
   2) включение этих генов в автономно реплицирующуюся гене-
тическую структуру (векторную молекулу) и создание рекомби-
нантной ДНК;
   3) введение рекомбинантных молекул ДНК в клетку-реципиент
и включение ее в хромосомный аппарат;
   4) отбор трансформированных клеток, в геном которых вклю-
чен переносимый ген.
   Для трансформации растений была использована природная
способность    агробактерий    (Agrobacterium   tumefaciens  и
Agrobacterium rhizogenes) переносить определенные последова-
тельности ДНК в растительный геном. Агробактерии, представ-
ляющие собой почвенные бактерии, вызывают опухолевые забо-
левания растений. Индукция опухолей обуславливается
бактериальными мегаплазмидами – Ti-плазмидами и Ri-
плазмидами. В Ti-плазмидах различных штаммов агробактерий
имеются 4 области гомологии: Т-ДНК (от англ. Transfered) и vir-
область, связаны с опухолеобразованием, 2 другие вовлечены в
конъюгационныи перенос и репликацию плазмид в клетках агро-
бактерий. В процессе опухолеобразования Т-ДНК переносится в
клетки растения и встраивается в их ядерный геном. Т-ДНК ста-
бильна в растительном геноме. В растительную ДНК может вклю-
чаться одна или более копий Т-ДНК. Место встраивания Т-ДНК в
растительную ДНК случайно. Общая организация генов Т-ДНК и
их флакирующих областей сходна с таковой эукариотических ге-
нов, хотя они не содержат интронов. Области Т-ДНК
Agrobacterium tumefaciens и Agrobacterium rhizogenes фланкиро-
ваны прямыми повторами длиной 25 пар нуклеотидов (п.н.), и
концы Т-ДНК, интегрированной в растительный геном, обнаружи-
ваются вблизи этих последовательностей.
   В начале 80-х годов исследователями было установлено, что
кодируемые Ti-плазмидой онкогены не участвуют ни в переносе
Т-ДНК в растительную клетку, ни в ее интеграции с ядерной ДНК.
Следовательно, эти гены можно было заменить, встроив вместо
них чужеродную ДНК. При этом плазмиды теряют онкогенные
свойства. Принимая во внимание характер переноса генов, осу-

                               220