Основы производства безопасной и экологически чистой животноводческой продукции. Александров Ю.А. - 223 стр.

UptoLike

Составители: 

221
ществляемого агробактериями, любую клонированную чужерод-
ную ДНК можно перенести в геном клетки двудольного растения.
Чужеродная ДНК, которую собираются перенести, должна быть
флакирована концевыми последовательностями Т-ДНК и ста-
бильно поддерживаться в штамме агробактерии, несущем пол-
ный набор vir-генов. Для разрешения проблемы идентификации
трансформированных клеток между повторами длиной 25 п.н.
встраивают бактериальные гены устойчивости к антибиотикам,
помещенные под контроль промоторов Т-ДНК и снабженные сиг-
налами полиаденилирования.
Ключевым моментом конструирования трансгенных растений
является оптимизация адресной «доставки» трансгенов и их экс-
прессии, которая базируется на результатах изучения особенно-
стей стратегии реализации геномов про- и эукариотического про-
исхождения, в том числе генома растительных клеток.
Со времени создания первого трансгенного растения достиг-
нут большой прогресс в разработке систем и приемов направлен-
ного введения чужеродного генетического материала в расти-
тельные клетки. В зависимости от целей, а также объекта
исследований сегодня применяются различные системы транс-
формации растений. Основными из них являются агроинфекция с
использованием агробактерии, трансфекции ДНК в растительные
клетки, трансформация интактных растительных тканей.
Так, используя современные методы трансформации расте-
ний, американскими учеными была создана сахарная свекла ли-
нии 77, устойчивая к гербициду глифосату (производство «Мон-
санто Ко»). При ее создании была выделена последовательность
ДНК, кодирующая синтез фермента 5-енол-пирувилшикимат-3-
фосфатсинтазы, который участвует в биосинтезе ароматических
аминокислот и является мишенью для глифосата. Для обеспече-
ния более высокой экспрессии бактериального гена у растений
указанная последовательность ДНК была модифицирована и
встроена в геном сахарной свеклы. Последовательность амино-
кислот 5-енол-пирувилшикимат-3-фосфатсинтазы из
Agrobacterium stram СР, создающая устойчивость растения к
глифосату, на 26% идентична ферменту растений.
Ген устойчивости к колорадскому жуку выделили из бактерии
Bacillus thuringiensis, которая живет на листьях картофеля. Этот
ген встроили в геном картофеля, в результате чего его листва
стала несъедобной для колорадского жука.
С целью повышения эффективности доставки гетерологичных
генов в клетки Дж. Санфорд из Калифорнийского университета
ществляемого агробактериями, любую клонированную чужерод-
ную ДНК можно перенести в геном клетки двудольного растения.
Чужеродная ДНК, которую собираются перенести, должна быть
флакирована концевыми последовательностями Т-ДНК и ста-
бильно поддерживаться в штамме агробактерии, несущем пол-
ный набор vir-генов. Для разрешения проблемы идентификации
трансформированных клеток между повторами длиной 25 п.н.
встраивают бактериальные гены устойчивости к антибиотикам,
помещенные под контроль промоторов Т-ДНК и снабженные сиг-
налами полиаденилирования.
   Ключевым моментом конструирования трансгенных растений
является оптимизация адресной «доставки» трансгенов и их экс-
прессии, которая базируется на результатах изучения особенно-
стей стратегии реализации геномов про- и эукариотического про-
исхождения, в том числе генома растительных клеток.
   Со времени создания первого трансгенного растения достиг-
нут большой прогресс в разработке систем и приемов направлен-
ного введения чужеродного генетического материала в расти-
тельные клетки. В зависимости от целей, а также объекта
исследований сегодня применяются различные системы транс-
формации растений. Основными из них являются агроинфекция с
использованием агробактерии, трансфекции ДНК в растительные
клетки, трансформация интактных растительных тканей.
   Так, используя современные методы трансформации расте-
ний, американскими учеными была создана сахарная свекла ли-
нии 77, устойчивая к гербициду глифосату (производство «Мон-
санто Ко»). При ее создании была выделена последовательность
ДНК, кодирующая синтез фермента 5-енол-пирувилшикимат-3-
фосфатсинтазы, который участвует в биосинтезе ароматических
аминокислот и является мишенью для глифосата. Для обеспече-
ния более высокой экспрессии бактериального гена у растений
указанная последовательность ДНК была модифицирована и
встроена в геном сахарной свеклы. Последовательность амино-
кислот         5-енол-пирувилшикимат-3-фосфатсинтазы          из
Agrobacterium stram СР, создающая устойчивость растения к
глифосату, на 26% идентична ферменту растений.
   Ген устойчивости к колорадскому жуку выделили из бактерии
Bacillus thuringiensis, которая живет на листьях картофеля. Этот
ген встроили в геном картофеля, в результате чего его листва
стала несъедобной для колорадского жука.
   С целью повышения эффективности доставки гетерологичных
генов в клетки Дж. Санфорд из Калифорнийского университета
                                221