ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
45
вило, очень невелико, что обусловливает специфику и необходи-
мость особо точных методов определения многих витаминов.
Единого метода определения витаминов нет и не может
быть, так как химически это совершенно разные вещества, кото-
рые объединяются лишь по своим биологическим свойствам, но в
отличие от других биологически активных веществ, они дейст-
вуют не на один какой-то орган, а на всю жизнедеятельность ор-
ганизма.
Качественные реакции на отдельные витамины зависят от
того, к какой группе химических соединений они относятся. Ко-
личественное определение витаминов проводится большей ча-
стью с помощью различных физико-химических методов, в пер-
вую очередь, с помощью спектральных методов анализа. Следует
отметить, что для определения любого витамина необходимо
иметь образцы тех же чистых витаминов для проведения кон-
трольного «холостого» титрования или приготовления эталонных
растворов. Фотоколориметрический и спектрофотометрический
методы используются для определения содержания витаминов А,
В
6
, РР, Р, С, Е, К. Люминесцентный (флуоресцентный) метод
применяют для определения витаминов В
1
, В
2
, В
с
.
Мы не будем останавливаться на всех методах определе-
ния витаминов, потому что все они очень трудоемки в плане
предварительной подготовки пробы к фотометрированию или
флуориметрированию. Для примера рассмотрим методы опреде-
ления витамина С (водорастворимого) и витамина А (жирорас-
творимого).
Для определения аскорбиновой кислоты предложено не-
сколько методов, основанных на ее сильной восстановительной
способности.
Классическим является титрование водных экстрактов
или водных экстрактов с добавлением органических растворите-
лей (хлороформа, дихлорэтана, толуола) краской Тильманса (рас-
твор 2,6–дихлорфенолиндофенола). В конце титрования окраска
изменяется из синей в розовую. Параллельно проводят «холо-
стой» опыт. Кроме того, можно тировать аскорбиновую кислоту
йодометрическим методом, но титрование проводят не раствором
йода или тиосульфата натрия, а раствором йодата калия (с крах-
малом) до появления стойкого светло-синего окрашивания.
46
Фотоколориметрическое или спектрофотометрическое
определение аскорбиновой кислоты проводят с добавлением в
качестве реактива фосфорномолибденовой кислоты Н
7
Р(Мо
2
О
7
)
6
.
Н
2
О после предварительного хроматографирования. При восста-
новлении фосфорномолибденовой кислоты образуется продукт
синего цвета. Параллельно фотометрируют раствор стандартного
образца аскорбиновой кислоты.
В последние годы для определения витамина С стали ис-
пользовать ВЭЖХ (высокоэффективную жидкостную хромато-
графию).
Витамин А определяют в жирах рыб и морских млекопи-
тающих, в таблетках или драже, а каротиноиды определяют в
растениях. Для определения в растениях каратиноиды экстраги-
руют ацетоном или этанолом, затем обрабатывают экстракт пет-
ролейным эфиром и пропускают через колонку с оксидом алю-
миния. Собранную вытяжку фотометрируют, сравнивая со стан-
дартным образцом.
Подобные способы применяются для определения других
витаминов. Как уже было отмечено, главная трудность состоит в
предварительной подготовке образцов, то-есть, извлечении из
них чистых витаминов в виде экстрактов, а также в том, что не-
обходимо иметь стандартные образцы для определения кон-
трольного титрования или приготовления эталонных растворов.
При исследовании растительного сырья в полевых усло-
виях применяют экспресс-методы определения биологически ак-
тивных веществ. Обычно их используют при проведении скри-
нинга (поиска) с целью отбора растений для последующего де-
тального исследования в стационарных условиях, с которым мы
кратко познакомились.
вило, очень невелико, что обусловливает специфику и необходи- Фотоколориметрическое или спектрофотометрическое
мость особо точных методов определения многих витаминов. определение аскорбиновой кислоты проводят с добавлением в
Единого метода определения витаминов нет и не может качестве реактива фосфорномолибденовой кислоты Н7Р(Мо2О7)6 .
быть, так как химически это совершенно разные вещества, кото- Н2О после предварительного хроматографирования. При восста-
рые объединяются лишь по своим биологическим свойствам, но в новлении фосфорномолибденовой кислоты образуется продукт
отличие от других биологически активных веществ, они дейст- синего цвета. Параллельно фотометрируют раствор стандартного
вуют не на один какой-то орган, а на всю жизнедеятельность ор- образца аскорбиновой кислоты.
ганизма. В последние годы для определения витамина С стали ис-
Качественные реакции на отдельные витамины зависят от пользовать ВЭЖХ (высокоэффективную жидкостную хромато-
того, к какой группе химических соединений они относятся. Ко- графию).
личественное определение витаминов проводится большей ча- Витамин А определяют в жирах рыб и морских млекопи-
стью с помощью различных физико-химических методов, в пер- тающих, в таблетках или драже, а каротиноиды определяют в
вую очередь, с помощью спектральных методов анализа. Следует растениях. Для определения в растениях каратиноиды экстраги-
отметить, что для определения любого витамина необходимо руют ацетоном или этанолом, затем обрабатывают экстракт пет-
иметь образцы тех же чистых витаминов для проведения кон- ролейным эфиром и пропускают через колонку с оксидом алю-
трольного «холостого» титрования или приготовления эталонных миния. Собранную вытяжку фотометрируют, сравнивая со стан-
растворов. Фотоколориметрический и спектрофотометрический дартным образцом.
методы используются для определения содержания витаминов А, Подобные способы применяются для определения других
В6, РР, Р, С, Е, К. Люминесцентный (флуоресцентный) метод витаминов. Как уже было отмечено, главная трудность состоит в
применяют для определения витаминов В1, В2, Вс. предварительной подготовке образцов, то-есть, извлечении из
Мы не будем останавливаться на всех методах определе- них чистых витаминов в виде экстрактов, а также в том, что не-
ния витаминов, потому что все они очень трудоемки в плане обходимо иметь стандартные образцы для определения кон-
предварительной подготовки пробы к фотометрированию или трольного титрования или приготовления эталонных растворов.
флуориметрированию. Для примера рассмотрим методы опреде- При исследовании растительного сырья в полевых усло-
ления витамина С (водорастворимого) и витамина А (жирорас- виях применяют экспресс-методы определения биологически ак-
творимого). тивных веществ. Обычно их используют при проведении скри-
Для определения аскорбиновой кислоты предложено не- нинга (поиска) с целью отбора растений для последующего де-
сколько методов, основанных на ее сильной восстановительной тального исследования в стационарных условиях, с которым мы
способности. кратко познакомились.
Классическим является титрование водных экстрактов
или водных экстрактов с добавлением органических растворите-
лей (хлороформа, дихлорэтана, толуола) краской Тильманса (рас-
твор 2,6–дихлорфенолиндофенола). В конце титрования окраска
изменяется из синей в розовую. Параллельно проводят «холо-
стой» опыт. Кроме того, можно тировать аскорбиновую кислоту
йодометрическим методом, но титрование проводят не раствором
йода или тиосульфата натрия, а раствором йодата калия (с крах-
малом) до появления стойкого светло-синего окрашивания.
45 46
