Органическая химия. Методические указания. Аюрова О.Ж. - 18 стр.

воздухе 5-10 мин. Затем ее опрыскивают диазотированной        Реактивы и посуда:
солью сульфаниловой кислоты в 10% растворе соды. Опры-        Смесь аминокислот
скивание производят осторожно из пульверизатора с помо-       Чистые аминокислоты (аланин, аспарагиновая кислота, ва-
щью лаборанта. После опрыскивания появляется окрашива-        лин)
ние в виде нескольких пятен. Исследуемые вещества прояв-      Растворитель (смесь бутанола, уксусной кислоты, воды -
ляются в виде отдельных пятен между линией старта (место      БУВ) 4:1:5
нанесения вещества) и линией финиша (крайняя верхняя          Проявитель (0,5 % раствор нингидрина в ацетоне)
граница, до которой продвинулся растворитель.)                Хроматографическая бумага
                             Положение исследуемых ве-        Стеклянные капилляры                             3 шт.
                             ществ, находящихся в виде ок-    Чашки Петри                                      2 шт.
                             рашенных пятен между линией      Простой карандаш
                             старта и линией фронта, харак-
                             теризуется физической кон-       !!!  – работу выполнять аккуратно. Бумажную хромато-
                             стантой Rf. Величину Rf (коэф-   грамму держать руками только за края. Пользоваться
                             фициент удерживания или рас-     только простым карандашом.
                             пределения) вычисляют по                  Хроматографическая камера состоит из двух чашек
                             уравнению: Rf = в/а,             Петри равного диаметра. В нижнюю из них помещают рас-
       где в - это расстояние от стартовой линии до центра    творитель - смесь БУВ (4:1:5). Из куска специальной фильт-
пятна, а - расстояние от стартовой линии до финиша. Вели-     ровальной бумаги для хроматографии вырезают диск диа-
чина Rf характерна для соединения, обнаружение которого       метром 10-12 см, в центре которого наносят кружок диамет-
ведется в строго определенных условиях и зависит от спосо-    ром 1-1,5 см (старт). По окружности наносят капилляром ис-
ба работы адсорбента, растворителя количества нанесенного     следуемую смесь веществ и чистые вещества - «свидетели»
вещества, длины пробега растворителя. Тонкослойная хро-       ( т.е. возможные компоненты в смеси). Работа проводится по
матография - очень удобный способ для разделения неболь-      нанесению на бумажный диск растворов аминокислот на
ших количеств многокомпонентных смесей веществ. Пре-          специальном столе или на чистой бумаге. После нанесения
имущества этого метода - быстрота и большая чувствитель-      всех пятен бумажному диску нужно дать высохнуть, а само-
ность (0,1-0,05 г вещества).                                  му в это время вымыть руки и сделать отверстие в центре
       А, Б - чистые вещества («свидетели»)                   диска и вставить в него фитилек (для этого полоску бумаги
       С - смесь веществ                                      сворачивают в узкую трубочку, следите, чтобы фитиль не
       Задание: Нарисовать хроматограмму, рассчитать Rf       был плоским, иначе растворитель будет распространяться по
каждого пятна и сделать вывод о компонентах смеси.            диску не радиально!). Длина фитиля должна соответствовать
                                                              высоте нижней чашки Петри. Далее приготовленную хрома-
          3.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ                        тограмму помещают в камеру, которую оставляют в покое до
            РАДИАЛЬНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ                         тех пор, пока растворитель, распространяясь радиально по