ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
Клетки разрушались в течение нескольких минут исти-
ранием между стеклянными бусами; амплитуда и частота
вибрации могла варьировать, как видно из рисунка.
В экспериментах по определению способа передачи ко-
лебательной энергии жидкости в камере водно-ледяная
смесь была помещена на глубину 7,75 см в камеру, охлаж-
денную предварительно льдом. После 2-минутной вибрации
было измерено повышение температуры жидкости. Камера
имела внутренний диаметр 5,2 см, а частота колебаний с по-
стоянной амплитудой менялось от 30 до 175 циклов/сек.
На рис. 6.5 показано повышение температуры в зависи-
мости от вибрации: очевидно, что оптимальная частота
имеет порядок 150 циклов/сек. Роджерс и др. исследовали
влияние других факторов, например, объема жидкости в
каждой камере, амплитуды вибрации и количества бус на
эффективность разрушения
клеток в «Сономеке».
Рис. 6.5. Влияние частоты колеба-
ний на температуру в дезинтегра-
торе «Сономек».
Ферментная активность
фракций, полученных с по-
мощью «Сономека» из сус-
пензии пекарских дрожжей,
приведена в таблице 6.1. В
этой таблице приведены также результаты, полученные при
изучении дезинтегратора прессового типа. Камера, исполь-
зованная в этом исследовании, имела внутренний диаметр
5,2 см, а частота и амплитуда колебаний были равны соот-
ветственно 117 циклов/сек и 0,3 см. К 150 мл суспензии
дрожжей, содержащей 2,5·10
9
клеток/мл, добавляли 50 г ша-
риков баллотини №12 и смесь подвергали вибрации в тече-
нии 5 мин. Применявшийся в этих исследованиях пресс был
сделан Хьюзом и не отличался принципиально от описан-
ных ранее; рабочая температура в прессе равна –23
о
С.
Таблица 6.1
Оборудова-
ние
Фракция Фумараза
Дегидроге-
наза мо-
лочной
к-ты
Дегидроге-
наза янтар-
ной к-ты
Алко-
гольде-
гидроге-
наза
«СОНОМЕК»
S
1
790 27,7 2,0 3,4
»
S
2
340 36,0 6,3 3,5
»
S
3
304 36,0 1,9 4,9
»
R
2
193 12,0 3,8 0,5
»
R
3
2110 4,8 8,2 1,9
ПРЕСС
S
1
297 18,75 1 »2 3,5
»
S
2
416 19,5 4,3. 2,8
»
S
3
403 24 0 2,1 2,6
»
R
2
0 35,0 22,0 0.2
»
R
3
258 41,0 41
0 1 3
Материал, полученный двумя способами, центрифугирова-
ли при температуре 2° С и 10 тыс. об/мин в течение 1 мин
для отделения целых клеток («Сономек» - 47% целых кле-
ток; пресс - 12,2%). Полученный свободный от клеток пре-
парат (
S
1
) фракционировали на R
2
и супернатант S
2
в цен-
тробежном поле при 12 тыс. об/мин в течение 6 мин. Су-
пернатант
S
2
в дальнейшем фракционировали на осадок R
3
и
супернатант
S
3
центрифугированием при 50 тыс. об/мин в
течение 10 мин. Осадки
R
2
и R
3
суспендировались в фосфат-
ном буфере и ферментную активность определяли как пока-
зано в таблице.
Клетки разрушались в течение нескольких минут исти- нии 5 мин. Применявшийся в этих исследованиях пресс был
ранием между стеклянными бусами; амплитуда и частота сделан Хьюзом и не отличался принципиально от описан-
вибрации могла варьировать, как видно из рисунка. ных ранее; рабочая температура в прессе равна –23оС.
В экспериментах по определению способа передачи ко-
лебательной энергии жидкости в камере водно-ледяная Таблица 6.1
смесь была помещена на глубину 7,75 см в камеру, охлаж- Дегидроге- Дегидроге- Алко-
денную предварительно льдом. После 2-минутной вибрации Оборудова-
Фракция Фумараза
наза мо- наза янтар- гольде-
было измерено повышение температуры жидкости. Камера ние лочной ной к-ты гидроге-
к-ты наза
имела внутренний диаметр 5,2 см, а частота колебаний с по-
«СОНОМЕК» S1 790 27,7 2,0 3,4
стоянной амплитудой менялось от 30 до 175 циклов/сек.
На рис. 6.5 показано повышение температуры в зависи- » S2 340 36,0 6,3 3,5
мости от вибрации: очевидно, что оптимальная частота » S3 304 36,0 1,9 4,9
имеет порядок 150 циклов/сек. Роджерс и др. исследовали
влияние других факторов, например, объема жидкости в » R2 193 12,0 3,8 0,5
каждой камере, амплитуды вибрации и количества бус на » R3 2110 4,8 8,2 1,9
эффективность разрушения ПРЕСС S1 297 18,75 1 »2 3,5
клеток в «Сономеке».
» S2 416 19,5 4,3. 2,8
Рис. 6.5. Влияние частоты колеба- » S3 403 24 0 2,1 2,6
ний на температуру в дезинтегра-
торе «Сономек».
» R2 0 35,0 22,0 0.2
» R3 258 41,0 41 0 13
Ферментная активность
фракций, полученных с по-
мощью «Сономека» из сус- Материал, полученный двумя способами, центрифугирова-
пензии пекарских дрожжей, ли при температуре 2° С и 10 тыс. об/мин в течение 1 мин
приведена в таблице 6.1. В для отделения целых клеток («Сономек» - 47% целых кле-
этой таблице приведены также результаты, полученные при ток; пресс - 12,2%). Полученный свободный от клеток пре-
изучении дезинтегратора прессового типа. Камера, исполь- парат (S1) фракционировали на R2 и супернатант S2 в цен-
зованная в этом исследовании, имела внутренний диаметр тробежном поле при 12 тыс. об/мин в течение 6 мин. Су-
5,2 см, а частота и амплитуда колебаний были равны соот- пернатант S2 в дальнейшем фракционировали на осадок R3 и
ветственно 117 циклов/сек и 0,3 см. К 150 мл суспензии супернатант S3 центрифугированием при 50 тыс. об/мин в
дрожжей, содержащей 2,5·109клеток/мл, добавляли 50 г ша- течение 10 мин. Осадки R2 и R3 суспендировались в фосфат-
риков баллотини №12 и смесь подвергали вибрации в тече- ном буфере и ферментную активность определяли как пока-
зано в таблице.
