Биохимия. Березовская В.А. - 67 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

КамчатГТУ | Петропавловск-Камчатский

Составители: 

Рубрика: 

пробирок следят, чтобы в них не попадала вода, так как при ее
попадании раствор мутнеет и это мешает колориметрированию.
По окончании нагревания пробирки быстро охлаждают в проточ-
ной воде и оставляют в темном месте на 30 мин.
4.2.2. Определение оптической плотности.
Окрашенные растворы колориметрируют на фотоэлектроко-
лориметре в кювете толщиной 0,5 см при длине волны 620 нм
(красный светофильтр) против раствора сравнения. Для каждого
раствора определяют оптическую плотность и полученные значе-
ния записывают в табл. 1.
Таблица 1
Зависимость между концентрацией глюкозы
и оптической плотностью раствора
Содержание
глюкозы, мкг
50 100 200 Мышечный
экстракт
Оптическая плотность
4.2.3. Расчет содержания гликогена.
На основании полученных данных строят калибровочный
график, откладывая на оси абсцисс концентрацию глюкозы, а на
оси ординат – оптическую плотность.
Расчет содержания глюкозы проводят по стандартной кри-
вой, которую строят для каждой серии определений.
Для пересчета на содержание гликогена полученное количе-
ство глюкозы умножают на коэффициент пересчета, равный 0,9.
Его получают следующим образом: молекулярная масса глюкоз-
ного остатка в гликогене равна 162,1; молекулярная масса глюко-
зы – 180,1. Разделив 162,1 на 180,1, получаем 0,9.
4.3. Проведение качественной реакции на молочную кислоту.
В пробирку наливают 20 капель 1%-ного раствора фенола,
2 капли 1%-ного раствора хлорного железа до появления фиоле-
тового цвета (реактив Уффельманна) и по каплям добавляют
15 капель полученного мышечного экстракта. Если в нем присут-
ствует молочная кислота, фиолетовая окраска жидкости перехо-
дит в желто-зеленую. Для сравнения проводят реакцию Уффель-
манна с раствором молочной кислоты и наблюдают появление
желто-зеленого окрашивания.
67
пробирок следят, чтобы в них не попадала вода, так как при ее
попадании раствор мутнеет и это мешает колориметрированию.
По окончании нагревания пробирки быстро охлаждают в проточ-
ной воде и оставляют в темном месте на 30 мин.
    4.2.2. Определение оптической плотности.
    Окрашенные растворы колориметрируют на фотоэлектроко-
лориметре в кювете толщиной 0,5 см при длине волны 620 нм
(красный светофильтр) против раствора сравнения. Для каждого
раствора определяют оптическую плотность и полученные значе-
ния записывают в табл. 1.
                                                            Таблица 1

              Зависимость между концентрацией глюкозы
                  и оптической плотностью раствора

        Содержание          50        100   200         Мышечный
       глюкозы, мкг                                      экстракт
 Оптическая плотность

    4.2.3. Расчет содержания гликогена.
    На основании полученных данных строят калибровочный
график, откладывая на оси абсцисс концентрацию глюкозы, а на
оси ординат – оптическую плотность.
    Расчет содержания глюкозы проводят по стандартной кри-
вой, которую строят для каждой серии определений.
    Для пересчета на содержание гликогена полученное количе-
ство глюкозы умножают на коэффициент пересчета, равный 0,9.
Его получают следующим образом: молекулярная масса глюкоз-
ного остатка в гликогене равна 162,1; молекулярная масса глюко-
зы – 180,1. Разделив 162,1 на 180,1, получаем 0,9.
    4.3. Проведение качественной реакции на молочную кислоту.
    В пробирку наливают 20 капель 1%-ного раствора фенола,
2 капли 1%-ного раствора хлорного железа до появления фиоле-
тового цвета (реактив Уффельманна) и по каплям добавляют
15 капель полученного мышечного экстракта. Если в нем присут-
ствует молочная кислота, фиолетовая окраска жидкости перехо-
дит в желто-зеленую. Для сравнения проводят реакцию Уффель-
манна с раствором молочной кислоты и наблюдают появление
желто-зеленого окрашивания.
                                 67

Страницы